临床微生物检验技术 第一节 细菌形态检验技术 第一节细菌形态检验技术.ppt

第五章 细菌检验技术 第一节 细菌形态检验技术 一、细菌染色标本镜检 二、细菌不染色标本镜检 3.荧光显微镜 细菌用荧光素染色，在荧光镜下激发荧光，可看到发射荧光的细菌。还应用于免疫荧光技术中。 4.电子显微镜 放大几十万至一百万倍，有透射电镜和扫描电镜。前者适于观察微生物内部超微结构，后者适于对微生物表面结构及附件观察。 一、 染色标本 细菌标本经染色后，除能清楚看 到细菌的形态、大小、排列方式外， 还可根据染色反应将细菌进行分类。 （一）细菌染色的一般程序 涂片 干燥 固定：杀灭细菌；改变细菌的通透性；使细菌附着于玻片上；保持细菌原有形态结构 染色 常用染料 染料：人工合成的含苯环的化合物 碱性染料：电离后显色离子带正电荷，易与带负电荷的被染物结合。碱性复红、结晶紫、美蓝等。 酸性染料 中性染料 单染色法 一种染料染色，如美蓝、稀释复红 观察形态、大小、排列 （二）复染色法（鉴别染色法） 两种（或以上）染料染色，观察形态结构、大小、排列，鉴别细菌种类 1．革兰染色 初染：结晶紫1min，水洗 媒染：卢戈碘液1min，水洗 脱色：95%乙醇0.5～1min，水洗 复染：稀释石炭酸复红/沙黄0.5～1min，水洗 最经典、最常用的染色方法。 通过革兰染色将所有细菌分为G+菌和G-菌两大类 意义 初步识别细菌，有助于进一步鉴定 为临床选择用药提供参考，帮助临床制订有针对性的治疗方案 与致病性有关 2．抗酸染色 5%石炭酸复红 3%盐酸酒精 美蓝 将细菌分为抗酸菌（红色）和非抗酸菌（蓝色）两大类。 二、 不染色标本 主要用于检查活菌的动力及运动方式。可对某些病原菌作出初步鉴定，如霍乱弧菌。 螺旋体由于不易着色并有形态特征，故多用不染色标本作暗视野显微镜检查。 压滴法 悬滴法 1.普通光学显微镜 油镜可放大1000倍，一般细菌均能清楚看到。 2.暗视野显微镜 光线从暗视野聚光器周边斜射至菌体，用于检查不染色的活细菌和螺旋体的形态及运动观察。 显微镜 革兰阳性菌 革兰阴性菌 染色结果 3、特殊染色 负染色 载玻片 细菌悬液 盖玻片 压滴法 * *