临床生物化学检验技术 任务一 体液蛋白质检测项目 溴甲酚绿法测定白蛋白（实验）.ppt

溴甲酚绿法测定－－ 血浆白蛋白 临床实践课注意事项： 已进入临床实验室（污染区） 注意生物安全防护： ① 必须穿白大衣，长发束紧，操作必须戴手套，不要随意触摸，操作完毕立刻摘掉手套，扔入医疗垃圾桶。 ②标本视为有潜在生物安全危害，小心操作，如有标本外溅在皮肤上，立刻用肥皂及流水冲洗，在桌面上，不要自行处理，赶紧报告老师。 ③不要冲洗随意丢失医疗垃圾，标本、试管放到试管架上，吸头用后放到指定垃圾处。 ④实验后立刻洗手，注意洗手步骤。 白蛋白（albumin , Alb) 1、概述： 肝实质细胞合成，分子量66 458，半衰期15～19天，是血浆中含量最多的蛋白质，占40～60％。 【试剂】 ①琥珀酸缓冲液(PH4.2)、叠氮钠、聚氧化乙烯月桂醚（brij-35)、BCG ②40g/L白蛋白标准液 【仪器】 半自动生化分析仪、自动生化分析仪、分光光度计 【实验步骤】（半自动生化分析法） ① 空白管、标准管、测定管 ② 手工操作：样品量：5μl 试剂量：1.5ml 室温放置5分钟 ③仪器参数：波长630nm 、 终点法等 【计算】 白蛋白浓度＝A样品/A标准×标准浓度(g/L) 【参考区间】 正常成人: 35－55g/L 【临床意义】 增高：严重失水、输入过多。 减少：丢失、肝脏疾病、消耗性疾病、腹水形成、肾病、 严重感染、胶原病。 血清白蛋白小于20g/L，临床可出现水肿。 实验小结： 1、样品白蛋白浓度超过60g/L,用生理盐水稀释样品后，重新测定，结果乘以稀释倍数。 2、加样枪的使用 * * 临床应用 血清蛋白在PH为8.8的缓冲条件下在琼酯糖凝胶上被清晰分离，用氨基黑染色，在酸性溶液中脱色 。 电泳技术 增高：严重失水、输入过多 减少：丢失、肝脏疾病、消耗性疾病、腹水形成、肾病、严重感染、胶原病。 1、营养 2、胶体渗透压 3、维持PH 4、运输作用 36~46g/L Alb 降低具有意义： 营养不良、急性炎症、恶性肿瘤、肝硬化、肾炎时血清浓度降低。 1、组织修补 2、运载功能 0.18~0.45g/L PA 临 床 意 义 生理功能 参考范围 2、测定方法：溴甲酚绿法 （推荐法） 【实验原理】 血清中白蛋白在pH4.2的缓冲液中带正电荷，在有非离子型表面活性剂存在时，可与带负电荷溴甲酚绿（bromocresol green,BCG）结合生成蓝绿色复合物，在630nm处有吸收峰，其颜色深浅与白蛋白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较，可测出白蛋白含量。 白蛋白+BCG → 白蛋白－BCG复合物 A=KLC *