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临床检验基础技术
尿蛋白定性检查
职业教育医学检验技术专业教学资源库
目录
CONTENT
1、加热乙酸法
1.原理 加热可使蛋白质变性凝固,稀乙酸接近蛋白质等电点,促使蛋白质沉淀,并溶解碱性盐类结晶
2.试剂 5%乙酸溶液
3.操作方法 尿液5ml→加热标本上1/3处至沸腾→观查结果→加乙酸→观查结果→继续加热至沸腾→立即观察结果
临检实操有拍摄
2、磺基水杨酸法
1.原理 磺基水杨酸为生物碱试剂,在酸性环境下,磺酸根离子与蛋白质的氮末端阳离子结合,生成不溶性蛋白盐沉淀
2.试剂 200g/L磺基水杨酸溶液
3.操作方法 尿液1ml→磺基水杨酸试剂1~2滴→立即观察结果
临检实操有拍摄
3、干化学试带法
利用指示剂的蛋白质误差原理。在pH3.2时,溴酚蓝产生阴离子,蛋白质(清蛋白)产生阳离子,二者结合后发生颜色变化,由淡黄色渐呈绿色乃至蓝色。
(1)待检者:检查前应清洁尿道口,采集中段尿。防治混入某些分泌 物或较多的细胞成分而引起假阳性
(2)标本:①标本应新鲜,浑浊尿应离心后测定上清液
(3)加热:在试管尿液中上1/3段尿液加热
(4)药物:药物的使用可出现假阴性或假阳性结果
但是各种方法的敏感度有所不同
蛋白质定性方法学评价
阳性标准及敏感度
蛋白质含量(g/L)
加热乙酸法
磺基水杨酸法
干化学试带法
-
<0.1
<0.05
<0.1
±
0.1~0.15
0.05~0.1
0.1~0.3
1+
0.2~0.5
0.1~0.5
0.3~1.0
2+
0.6~2.0
0.5~2.0
1.0~3.0
3+
2.0~5.0
2.0~5.0
3.0~8.0
4+
>5.0
>5.0
>8.0
评价
准确,可与尿中所有蛋白质反应,假阳性少。通常作为蛋白质的确证实验,但操作比较复杂
操作简便,敏感性高。清蛋白、球蛋白、本周蛋白均可检出,简便、快速,曾为CCCLS推荐位参考方法。干扰因素多,有些药物及盐类结晶可致假阳性
简便、快速,广泛用于健康普查和肾病筛查,但结果受尿液pH影响。对清蛋白敏感度高,对球蛋白灵敏度仅为清蛋白的1∕100~1∕50,与血红蛋白、肌红蛋白、黏蛋白、Tamm-Horsfall蛋白(T-H蛋白)及本-周蛋白等基本不反应*
1、生理性蛋白尿
功能性蛋白尿:指由于发热、剧烈运动、精神紧张等应激状态导致的蛋白尿
体位性蛋白尿:又称直立性蛋白尿。多见于瘦长体型的青少年。受试者在卧床休息时蛋白定性阴性;而站立活动时,则出现蛋白尿,无自觉症状。
2、病理性蛋白尿 根据其发生机制可分为六类:
肾小球性蛋白尿:某些因素导致肾小球滤过膜通透性增加,导致血浆蛋白滤出,超过肾小管重吸收能力,形成的蛋白尿。以清蛋白为主。见于急性肾小球肾炎,肾病综合征、紫癜性肾病等
肾小管性蛋白尿:炎症或中毒引起肾小管对蛋白质的重吸收能力降低而导致的蛋白尿,见于肾盂肾炎、间质性肾炎和肾小管性酸中毒等
混合性蛋白尿:肾脏病变相继累及肾小球和肾小管产生的蛋白尿。常见于慢性肾炎、慢性肾盂肾炎等
2、病理性蛋白尿 根据其发生机制可分为六类:
组织性蛋白尿:由于炎症或药物刺激,肾组织破坏、泌尿系统分泌蛋白质,进入尿液而形成的蛋白尿。其中T-H糖蛋白为主。
溢出性蛋白尿:循环血浆中某些低分子量蛋白质增多,超过肾小管重吸收能力所致。如血红蛋白尿、肌红蛋白尿等
偶然性蛋白尿:也称假性蛋白尿。当尿中混有多量血、脓、黏液等成分时,可导致蛋白质定性检查阳性,称假性蛋白尿。可提示下尿路及生殖道炎症
谢谢,再见!
永州职业技术学院基础医学部
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