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第二十二章 免疫学检测技术的基本原理 第二十二章 免疫学检测技术的基本原理 第一节 体外抗原抗体结合反应的特点及影响因素 第一节 体外抗原抗体结合反应的特点及影响因素 （一）抗原抗体反应特点 （一）抗原抗体反应特点 1 1．高度特异性 抗原与抗体的结合具有高度特异性，这种特异性是由抗原 ．高度特异性 抗原与抗体的结合具有高度特异性，这种特异性是由抗原 表位与抗体分子中的超变区互补结合所决定的。空间构型互补程度越高，抗原表 表位与抗体分子中的超变区互补结合所决定的。空间构型互补程度越高，抗原表 V V 位与抗体可变 （ ）区之间结合力越强，抗原抗体结合的特异性越强，亲和力也 位与抗体可变 （ ）区之间结合力越强，抗原抗体结合的特异性越强，亲和力也 越高。利用这一特点，在体外可以对许多未知的生物学物质进行特异性鉴定。如 越高。利用这一特点，在体外可以对许多未知的生物学物质进行特异性鉴定。如 利用抗伤寒杆菌的抗体检测伤寒杆菌；也可用已知的抗原 （如乙型肝炎病毒）来 利用抗伤寒杆菌的抗体检测伤寒杆菌；也可用已知的抗原 （如乙型肝炎病毒）来 检测相应的抗体 （抗乙型肝炎病毒抗体）。 检测相应的抗体 （抗乙型肝炎病毒抗体）。 2 2．表面化学基团之间的可逆结合 抗原抗体结合除了空间构象互补外，主 ．表面化学基团之间的可逆结合 抗原抗体结合除了空间构象互补外，主 要以氢键、静电引力、范德华力和疏水键等分子表面的化学基团之间的非共价方 要以氢键、静电引力、范德华力和疏水键等分子表面的化学基团之间的非共价方 式结合。这种非共价键不如共价键结合稳定，易受温度、酸碱度和离子强度的影 式结合。这种非共价键不如共价键结合稳定，易受温度、酸碱度和离子强度的影 响而解离，解离后抗原和抗体仍具有原有的特性。解离度主要取决于两个方面： 响而解离，解离后抗原和抗体仍具有原有的特性。解离度主要取决于两个方面： affinity affinity 一是抗体与抗原结合的亲和力 （ ）。亲和力指抗体分子单一抗原结合部位 一是抗体与抗原结合的亲和力 （ ）。亲和力指抗体分子单一抗原结合部位 与一个相应抗原表位之间互补结合的强度。抗体亲和力越高，解离度越低；反之 与一个相应抗原表位之间互补结合的强度。抗体亲和力越高，解离度越低；反之 抗体的亲和力越低，解离度越高。二是抗原抗体反应的环境因素如温度、酸碱度 抗体的亲和力越低，解离度越高。二是抗原抗体反应的环境因素如温度、酸碱度 和离子强度。因此在体外进行抗原抗体反应时，要求适当的温度、酸碱度和离子 和离子强度。因此在体外进行抗原抗体反应时，要求适当的温度、酸碱度和离子 强度等条件。 强度等条件。 1  1  Ag+Ab Ag+Ab K = K = （亲和常数） （亲和常数） Ag Ab Ag Ab 20 10-4- 13 7