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干细胞基础与临床应用基础研究幻灯片课件.ppt

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干细胞基础与临床应用基础研究;干细胞基础与应用基础研究(一) 细胞体外培养 基本技术和策略讨论;(一)基本概念 1;(一)基本概念 2;(二)基本条件(模拟);一、水;二、无机盐;三、理化条件 1;三、理化条件 2;三、理化条件 3;四、培养基的选择 1;二、常用类型 天然培养基:血清、胚胎渗出液、水解蛋白 合成培养基:RPMI1640、Eagle MEM系列(BME、DMEM、IMEM、αMEM)、HamF12。 无血清培养基:化学成分确定的培养基,对实验目的和细胞类型的针对性强。 1、基础培养液:DMEM ∶ HamF12 = 1 ∶ 1 2、附加成分: 根据实验目的、细胞类型等因素设定。如B27、N-2,针对神经元;G-5,针对神经胶质细胞 ;(三)基本步骤;一、取材 1;一、取材 2;一、取材 3;二、分离与纯化 1;二、分离与纯化 2;机械分离与酶学分离1;机械分离与酶学分离2;基于物理性状的分离纯化技术 1;介质选择的原则: 1、密度范围大 包括所需要的密度。 2、溶液的黏度低 较小离心力和较短离心 时间可达 到分离效果 3、易于测定其密度(浓度)。 4、不损伤细胞、不改变细胞生物学特性。 5、离心分离后易于除去。 6、不妨碍、不影响后续实验研究的目的。;基于物理形状的分离纯化技术 3 常用介质;基于物理形状的分离纯化技术 4 常用介质;基于物理形状的分离纯化技术 5 常用方法;基于物理形状的分离纯化技术 6 常用方法;基于物理形状的分离纯化技术 7 常用方法;根据其它细胞特性的分离方法1;根据其它细胞特性的分离方法2;三、原代培养 1;三、原代培养 2;三、原代培养 3 植块培养;三、原代培养 4 细胞培养;三、原代培养 5 培养空间;四、传代培养 1;四、传代培养 2;五、“二倍体细胞”的问题;六、体外培养细胞的生长与观察 1;六、体外培养细胞的生长与观察 2;六、体外培养细胞的生长与观察 3;六、体外培养细胞的生长与观察 4;六、体外培养细胞的生长与观察 5;六、体外培养细胞的生长与观察 6;六、体外培养细胞的生长与观察 7;六、体外培养细胞的生长与观察 9;关于“隔天换液”的辨析: 细胞周期(cell cycle): 是???细胞从前一次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程,分为间期与分裂期两个阶段;六、体外培养细胞的生长与观察 8;细胞株(系)的基本概念 1;细胞株(系)的基本概念 2;细胞株(系)的基本概念 3;细胞克隆 ;细胞周期与细胞同步化;国内外细胞库;此课件下载可自行编辑修改,仅供参考! 感谢您的支持,我们努力做得更好!谢谢

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