微生物发酵技术 任务二 生产车间种子培养 生产车间种子培养.ppt

项目四 种子扩大培养技术 单元二 微生物发酵制药技术基础 任务二 生产车间种子培养 生产车间种子制备是将实验室制备的孢子悬浮液或摇瓶种子接入种子罐，通过控制工艺条件，将菌种培养成为大量菌丝体的过程。 种子罐培养的目的是要大量培养有活力的、无杂菌的种子，即扩大培养。 1.培养基选择的原则 培养基应选用易被菌利用的成分如葡萄糖、玉米浆、磷酸盐等，如果是需氧菌，同时还需供给足够的无菌空气，并不断搅拌，使菌（丝）体在培养液中均匀分布，获得相同的培养条件。 培养基还要考虑对种子进行驯化，为了驯化种子适应发酵罐环境，种子罐中的培养基应逐渐接近发酵罐中的培养基配方和培养条件。 摇瓶菌丝体种子： 种子罐之间或发酵罐间的移种： 2.接种方法： 可在火焰保护下接入种子罐或采用压差法接入。 主要采用压差法，由种子接种管道进行移种，移种过程中要防止接受罐表压降至零。 摇瓶培养种子—火焰封口接种—种子罐培养种子 火焰封口接种 3.种子罐级数的确定 种子罐级数指制备种子时需扩大培养的次数. 种子制备的工艺过程中，因菌种不同，一般可以分为一级种子、二级种子和三级种子。 种子罐的级数主要取决于菌种的性质、菌体生长速度、产物品种、生产规模及发酵设备的合理利用率。 一级种子接入发酵罐发酵称为二级发酵 二级种子接入发酵罐发酵称为三级发酵 。。。。。。。 依次类推 可知发酵的级数=种子级数+1 种子罐级数的影响： 种子罐级数越少，越有利于简化工艺和控制，并可减少移种带来染菌机会。 但也必须考虑尽量延长发酵罐生产产物的时间，缩短由于种子发芽、生长而占用的非生产时间，以提高发酵罐的生产率。因此，种子罐级数不宜过少。 种子罐级数随菌种及规模而定，也与工艺条件有关。 优化种子罐培养条件，加速孢子发芽及菌体繁殖，也可减少种子罐的级数。 1、生长快的细菌，种子用量少，种子罐相应也少。 例如：谷氨酸生产中，菌接入种子罐32℃培养7-10h，即可接入发酵罐作为种子，这称为一级种子罐扩大培养，也称二级发酵。 2、生长较慢的菌种，种子用量大，种子罐相应也多。 例如：青霉素孢子悬液接入一级种子罐（发芽罐）于27℃培养40h，孢子发芽，长出短菌丝。 再移至第二级种子罐（繁殖罐），27℃培养10-24h，菌丝迅速繁殖，获粗壮菌体，即可移至发酵罐，这称为二级种子罐扩大培养，也称三级发酵。 一般50m3发酵罐都采用三级发酵。 3.生长更慢的菌种 链霉素生产菌种灰色链霉菌，一般采用三级种子罐扩大培养。 在小型发酵罐(5—30L)进行试验时，也有采用直接孢子或菌丝体接入罐中发酵，称一级发酵。