水产品检测技术1 组胺的测定 组胺测定-分光光度法.pptx

组胺的测定 ——分光光度法; ;组胺的产生;组胺是一种过敏性毒物，对组胺过敏的人，吃了一口含组胺的鱼就可能引起反应。中毒症状脸红、头晕、头痛、口肉麻木、眼部充血、荨麻疹、心跳加快，胸闷呼吸急促等。 人体中毒约1.5mg/kg。发病时间快，一般在10分钟到3小时内，发病率较高（30％左右），但是症状较轻，恢复也较快，多在翌日可自行痊愈。 限量：GB2733-2015 高组胺鱼类组胺含量不超过40mg/100g； 其他??海水鱼类组胺含量不超过30mg/100g。;有色化合物 480nm; 重氮盐的形成： 甲液：对硝基苯胺0.5g，加浓盐酸5mL，溶解后，加水至200mL，冰箱储存。 乙液：亚硝酸钠0.5g，加水溶解至100mL（现用现配）;二、试剂与仪器;④50g/L碳酸钠溶 ⑤250g/L氢氧化钠溶液 ⑥(1+11)盐酸溶液 ⑦偶氮试剂: 甲液(对硝基苯胺):称取0.5g对硝基苯胺，加5mL盐酸溶液溶解后，再加水稀释至200mL，临用现配。 乙液(亚硝酸钠溶液):称取0.5g亚硝酸钠，加入100mL水溶解混匀，临用现配。 吸取5mL甲液，40mL乙液混合即为偶氮试剂，临用现配。 ;三、分析步骤;2.抽提： 正戊醇抽提：取滤液2mL于分液漏斗中，加入25％NaOH使其呈碱性。再加入3mL正戊醇，振摇分层提取，然后取正戊醇层。 酸液提取： 取正戊醇液2mL，至于另一个漏斗中，加入3mLHCl（1mol/L），混合均匀，静止5分钟，分层，取下层盐酸溶液。重复提取3次，合并提取液。 ;3.显色反应：取2.0 mL盐酸提取液于10ml比色管，加入3mL Na2CO3 ，3mL偶氮试剂，混匀，用水稀释至10mL，混合后放置10分钟，在480nm测吸光度。 4、标准曲线的绘制：取组胺标准使用液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，加水至1mL，各加1mL HCl (1mol/L )、3mL Na2CO3 、偶氮试剂 3mL。同样操作，测定吸光度。确定组胺浓度与吸光值的关系曲线。;四、结果表述;四、结果表述; 感谢指导 期待合作