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动物疫病防治技术
实验实习指导
朱小甫 吴旭锦 编著
咸阳职业技术学院
生物科技系
2010年9月
目 录
TOC \o 1-3 \h \z \u 动物传染病实验室工作注意事项及防护处理 2
实验一 动物传染病的临诊记录和表报 5
实验二 消 毒 11
实验三 传染病病畜禽尸体的处理 17
实验四 免疫接种 19
实验五 病料的取材与送检 24
实验六 猪链球菌2型的实验室诊断 30
实验七 牛结核病的检疫 35
实验八 布鲁氏菌病的检疫 39
实验九 猪瘟的诊断 48
实验十 猪伪狂犬病的实验室诊断 52
实验十一 鸡伤寒和鸡白痢的诊断技术 55
实验十二 鸡新城疫的诊断 60
实验十三 鸡传染性法氏囊病的诊断 64
动物传染病实验室工作注意事项及防护处理
动物传染病往往借助人类的活动而传播,有些是人兽共患传染病,如炭疽、布氏杆菌病、结核、禽副伤寒、巴氏杆菌病等。动物传染病实验实习的对象和材料很多与病畜和病原微生物有关,所以学生在操作过程中的疏忽大意,就有可能人为传播动物传染病,引起疫病流行,甚至感染人身,危及生命,所以在实验实习时必须遵守以下规定,防止污染,养成良好的实验室操作习惯。
一、实验室工作注意事项
1.在实验时必须穿工作服,当接触或操作危险材料时,须穿戴胶靴、围裙、手套及眼镜,用后应立即消毒清洗后方可再用。在操作时一定要严肃认真。勿以手指或其他器物等接触口唇、眼、鼻和面部,手和面部有伤口时,应避免危险材料的接触。
2.使用危险材料应进行无菌操作,盛放危险材料的器皿要牢固,以免操作过程破裂,以防液体流出,造成污染。用过的尸体、内脏、血液以及废弃的培养基、生物制品等,须严加消毒或深埋。用过的棉球、纱布等污物,放在固定容器中,统一处理,不得随意抛弃。万一危险材料滴出或打翻,或发生其他意外,应立即报告指导老师及时处理。
3.当致病性细菌材料污染台面、地面、衣着或器械时,应立即用3%煤酚皂溶液或0.1%升汞溶液消毒。如手指及皮肤被污染,应立即用2%~3%来苏尔或其他消毒药洗涤,或用酒精棉球及碘酒擦拭;如溅入眼中,应立即用5%硼酸溶液冲洗;吸入口中时可用1%硼酸溶液漱口;被污染的衣帽可用5%石炭酸、10%中性福尔马林等浸湿消毒;桌面、地板或土地被污染时,应用5%石炭酸或10%中性福尔马林或其他消毒药沾湿布片覆盖,经数小时后拭去洗净,或倾注多量药液,使其充分湿透。
4.病料化验要体现快而准的原则,采集或接到病料时应尽可能及时进行检查和病原分离培养。作细菌学检查的病料冬季在室温下不得超过2d,夏日不得超过1d,需暂时放入冰箱时,病料中不得加防腐消毒剂。供血清学检查待分离血清的血液,一般不加防腐剂。
5.实验室应经常保持清洁、整齐、安静,禁止在室内吸烟、饮食,勿以手指或其他器械接触口唇、眼、鼻及面部。操作时必须严肃认真、聚精会神。如要求严格时,应在无菌室(经紫外线消毒)或超净工作台中进行。除平时进行一般打扫外,每隔一星期应大扫除一次。
6.接种环或接种针每次使用前后,必须通过火焰烧红灭菌,待冷却后,方可接种培养物,以免将待检的细菌灭杀,影响效果。使用后,亦需烧灼灭菌;含菌量多或含油质培养物时,需先浸入消毒药水中洗一下,再行烧灼灭菌,以免爆散。吸取菌液时,必须用加有橡皮吸头的吸管,切勿直接用口吸取。吸管下端使用前亦需通过火焰灭菌,这样较为可靠。
7.实验完毕,整理桌面,两手应用肥皂和水洗净,必要时先用来苏尔(浓度不低于3%)消毒,然后用水冲洗。需消毒的器皿置消毒盘内,已接种好的培养基置培养箱中。显微镜用毕拭净放入箱内。同时应做好实验记录,如病禽脏器的剖检变化,细菌及病毒的各种化验结果等,都应如实填写和记录。
8.试验后的鸡胚应煮沸消毒0.5 h以上;实验动物尸体焚化;小白鼠排泄物及鼠缸内垃圾经103 kPa(15磅)20 min高压灭菌或焚烧;家兔、豚鼠粪尿混合物1份加漂白粉5份,充分搅拌,消毒处理2h。
9.实验室最易发生着火、漏水及触电事故,工作人员应本着认真负责的态度,在实验中注意药品(特别是易燃、易爆物品)的存放,节约水电。离开实验室时应对自来水、电源、煤气、门窗等检查一遍,注意安全。
二、意外事件的预防和处理
从事实验室工作的人员必须认真细致,如不小心就有遭遇意外危险的可能,如剖检感染动物和检验细菌标本时受感染,不慎吸入菌液或腐蚀性毒物,发生烫伤或割伤等。这类事件多发生于缺乏经验或初从事实验室工作的人员。有时因谈话或其他事务分心,思想不集中,即使有经验的工作者,亦有可能发生意外。为避免临时慌张,熟悉预防与处理方法实为必要。
(一)意外事件的预防
1.重要设备及精密仪器
温
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