中药制剂检测技术 知识点1：化学反应鉴别法 项目2任务3知识点1-《中药制剂鉴别技术》电子讲义.doc

《中药制剂鉴别技术》电子讲义 知识点 化学鉴别法 学时 2学时 教学内容 化学鉴别法的原理、仪器与试剂、操作方法、注意事项与应用实例。 教学重点 理化鉴别方法 教学难点 操作方法 参考资料 中药制剂检测技术，田友清，人民卫生出版社，2018年 中药制剂检测技术，张钦德，人民卫生出版社，2013年 中药制剂检测技术，卓菊，中国医药科技出版社，2013年 讲义内容： 化学反应鉴别法 （一）概述 本法是利用化学试剂与制剂中的指标成分发生化学反应，根据所产生的颜色、沉淀或气体等现象，来判断某些药味或成分的有无，并以此鉴别制剂真伪的方法。具有操作简便，适用性较强等特点。 利用化学反应鉴别法鉴别中药制剂时一般需采取分离、提取、纯化和富集被检成分等步骤，选择专属性较强的检测试剂，以排除干扰组分的影响，必要时做阳性或阴性对照试验加以验证，以提高本鉴别法的专属性和灵敏度。例如止喘灵注射液中麻黄的鉴别，正反应颜色较浅，可采用空白对照试验，以消除背景颜色对结果判断的干扰。具体做法是：取本品20ml，加氨试液使成碱性，用三氯甲烷提取2次，每次10ml，合并三甲烷液，取三氯甲烷液4ml，分置2支试管中，一管加氨制氯化铜试液与二硫化碳各5滴，振摇，静置，三氯甲烷层显黄色至黄棕色；另一管为空白，以三氯甲烷5滴代替二化碳，振摇后三氯甲烷层应无色或显微黄色。 由于本法大多为某类成分的通用显色或沉淀反应，因此它只能鉴别待测成分属何类成分，而不能鉴别其为何种成分，其否定功能强于肯定功能，专属性较差。如用盐酸-镁粉反应鉴别大山楂丸中的山楂，当呈阴性反应时，可得出样品中不含山楂黄酮和山楂的结论；若呈阳性反应，则只能说明存在黄酮类成分，要想确定是否存在山楂，还需配合其他鉴别方法。《中国药典》2010年版取消了复方丹参滴丸、复方鱼腥草片、苏合香丸等利用化学反应鉴别的内容，改用专属性强的TLC法，以提高鉴别结果的可靠性。本法主要用于制剂中生物碱、黄酮类、蒽醌类、皂苷、香豆素、萜类以及各种矿物类成分的鉴别。 《中国药典》常用的化学鉴别反应归纳如下： （二）仪器与试剂 试管、蒸发皿、坩埚、漏斗、滤纸、水浴锅、电炉、电热套等；各类成分显色剂和沉淀试剂。要求：所有仪器应洁净，以免干扰化学反应；试药应符合2015年版《中国药典》的要求，使用时应研成粉末或配成试液；除另有规定外，所用试液均应按2015年版《中国药典》规定的方法进行配制和贮藏，要求新配制的，必须临用新制。 （三）操作方法 1.供试品溶液的制备 （1）固体制剂：应根据鉴别对象的溶解性能，选用适当溶剂提取精制而成。如用水室温下浸泡过夜，溶液可供氨基酸、蛋白质等的鉴别；用60℃热水提取，溶液可供糖类、苷类、鞣质等成分的鉴别；用乙醇或甲醇回流提取，滤液可用于鉴别生物碱、黄酮、醌类、有机酸等；用亲脂性有机溶剂（如乙醚）提取，溶液可用于鉴别醌类、内酯、苷元、挥发油等；药渣挥去乙醚，再用甲醇提取，滤液可用来鉴别各种苷类。经溶剂提取所得提取液一般仍含较多的杂质，可采取液-液萃取法或固-液萃取法进一步分离，除去干扰成分。制剂中的挥发性、升华性成分可用水蒸气蒸馏法或升华法将其分离后再进行鉴别，可提高鉴别反应的专属性。 （2）液体制剂：可直接取样检识或经有机溶剂萃取分离后再行检测。 2.操作方式 采用化学反应鉴别法时，应选择专属性较强的检测试剂，必要时做阳性或阴性对照试验加以验证，从而保证检测结果的专属性和灵敏度。化学反应鉴别法大多为试管反应，取供试液适量置于试管中，加人试剂或试药进行反应；或将供试液置蒸发皿或坩埚中，挥去溶剂，滴加试剂于残留物进行检识，例如皂苷的醋酐-浓硫酸反应；也可利用检测试纸鉴别，如氰苷的苦味酸试纸反应、珠黄吹喉散的姜黄试纸反应和养阴清肺膏的Gibbs试纸反应等。 （四）注意事项 1.供试品和供试液的取用量应按各该药品项下的规定，固体供试品应研成细粉；液体供试品如太稀可浓缩，如太浓可稀释。 2.试药和试液的加入量、方法和顺序均应按各试验项下的规定；如未作规定，试液应逐滴加人，边加边振摇；并注意观察反应现象。 3.试验在试管或离心管中进行，如需加热，应小心仔细，并使用试管夹，边加热边振摇，试管口不要对着试验操作者。 4.试验中需要蒸发时，应置于玻璃蒸发皿或瓷蒸发皿中，在水浴上进行。 5.有色沉淀反应宜在白色点滴板上进行，白色沉淀反应宜在黑色或蓝色点滴板上进行，也可在试管或离心管中进行；颜色反应须在玻璃试管中进行。 6.反应灵敏度高的试验，应保证试剂的纯度和仪器的洁净，并同时进行空白试验，以资对照；反应不够灵敏，试验条件不易掌握的试验，可用对照品进行对照试验。 （五）检验记录与结果判断 记录操作过程、供试品取用量、所加试剂的名称与用量、反应结果等。多批号供试品同时进行检验时，如结果相同，可只详细记录一个批号的情况，其余批号可