DB37∕T 1211-2009 猪繁殖与呼吸综合征快速诊断技术规范(山东省).pdf

ICS 65.020.30 B43 DB37 东 方 标 准 省 地 山 DB37/T 1211-2009 猪繁殖与呼吸综合征快速诊断 技术规范 Rapid diagnostic methods of porcine reproductive and respiratory syndrome 2009-03-03 发布 2009-04-01 实施 山东省质量技术监督局发布 DB37/T 1211-2009 目IJ 1=1 本标准的附录A 为规范性附录。 本标准由山东省农业科学院提出。 本标准由山东省畜牧业专业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位:山东省农业科学院畜牧兽医研究所。 本标准主要起草人: 王金宝、李俊、 吴家强、丛晓燕、张秀美。 DB37/T 1211-2009 猪繁殖与呼吸综合征快速诊断技术规范 1 范围 本标准规定了猪繁盟与呼吸综合征 (PRRS) 的 RT-PCR 诊断方法。 本标准适用于未免疫猪繁殖与呼吸综合征疫苗猪场的快速诊断、血液、细织脏器及材料的无吉化处 理。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款跑过本标准的引用而成为本标准的条款。儿是注日期的引用文刊，其随后所有的 修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文刊的必威体育精装版版本。凡是不注日期的引山文刊，其必威体育精装版版本适用于本标准。 盯/T 767 高致病性禽流感无害化处理技术规范 3 材料 3. 1 器材 3. 1. 1 微量移液器(5μL 和 100 口L) 3.1.2 20000g 低温离心机 3.1.3 聚合酶链式反应仪 3.1.4 北京六一电泳仪 3.1.5 水平电泳槽 3. 1.6 凝胶成像系统 3. 1.7 1L 容量瓶 3. 2 试剂 3. 2. 1 Trizol 3. 2. 2 三氯甲:院 3. 2. 3 异丙醇 3.2.4 DEPC (焦碳酸二乙醋)处理水:配制见A. 1 章。 3.2.5 75%乙醉:配制见A.2 章。 以上试剂全部为国产分析纯 3. 2. 6 电泳级 1%琼阳糖:配制见A. 3 章。 3.2.7 TAE T作液:配制见A.1 章。 3.2.8 10 mg/mL 的澳化乙链 CEB) 水潜液。 3.2.9 DNA Marker2000: 购白大连宝生物技术有限公司。 3. 3 寻|物 PSX1: 5-TGGTCCTAACGGTTCGGAAGAAAC-3 PSX2: 5-GTGAGCTGAGTATTTTGGGCGTGT-3 4 方法 4. 1 病料的处理 0 将病料剪碎放于灭菌的朋磨器中磨碎，用生理盐水 1 : 1 倍稀秤，取悬液 20 C反复冻融3 次， 8000g