完整版HPV的检测及其临床应用.ppt

HPV E7癌蛋白的分子生物学特性 .......... * 宫颈上皮细胞发生异常和瘤变的进化过程 基底细胞膜 正常 轻度 中度 原位 鳞状 细胞 癌变 上皮 变型 HSIL 细胞异型 CIN1 CIN2 CIN3 LSIL 巴氏涂片 活检 .......... * HPV致宫颈癌进展示意图 LSIL LSIL CIS CA 8—10年（100%治愈） 2—5年（死亡） 正常 低度 病变 高度 病变 原位癌 浸润癌 .......... * 关于HPV感染 HPV感染多数不发展成为宫颈癌，可以在9-16(8-10)个月消失; 间隔半年2次HPV（＋）; HPV持续感染; 28%的持续感染者,在2年内发展为CIN I；70% 的持续感染者4年内发展为CINII; .......... * HPV实验室检测 .......... * 　临床常用的HPV检测方法 病理学检查 细胞学检查 免疫组化检测 原位杂交技术检测 聚合酶链反应( PCR)技术　 DNA芯片分型检测 杂交捕获DNA分析 .......... * 病理学检查 鳞状上皮疣状乳头状增生 表皮角化不全 棘层不规则增厚 基底层增生 上皮脚延长 中表层出现灶状分布的挖空细胞等。 .......... * 　细胞学检查 凹空细胞、角化不良及湿疣外底层细胞 细胞学诊断HPV感染敏感性较差 .......... * 　 免疫组化检测 检测HPV的衣壳抗原来进一步明确HPV感染 所得阳性反应定位明确,判断可靠 必须在HPV-DNA 复制成熟后才有衣壳装备 敏感性较低 .......... * 原位分子杂交 用来测定基因或特定核苷酸序列在核酸分子的所在部位，检测重组体DNA） 通过非放射性探针对石蜡组织进行检测,能作定位检测,假阳性率低,但灵敏度不高,大大降低了临床使用价值。 .......... * 　聚合酶链反应( PCR)技术 设计与HPV-DNA互补的一对特异性核苷酸引物,以HPV-DNA为模板以指数增长的速率进行体外扩增 敏感性最高,可对HPV进行分型,测定病毒载量,发现新基因型,对基因进行序列分析 缺点为样品间易交叉污染导致假阳性 .......... * 　杂交捕获DNA分析 标本中的HPV-DNA 与液相中的RNA探针结合,形成特异性的RNA-DNA杂交体,被微孔板内的特异抗体所捕获,然后被所加的发光底物检测,其发光的强度与标本中的DNA 量成比例,因而可对HPV进行半定量检测 效率高,适于大量人群检测,临床上操作简便 .......... * .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu .iuu HPV的检测及其临床应用 陕 西 省 人 民 医 院 检 验 科 刘 文 康 .......... * HPV 乳头瘤病毒科属小DNA病毒 乳头瘤病毒的基因组主要编码三组基因 三个癌基因，包括E5、E6和E7，负责调节癌细胞转化过程； 两个调节基因，包括E1和E2，负责调节转录和病毒基因组的复制； 两个结构蛋白基因，包括L1和L2，组成病毒颗粒 .......... * HPV感染 属于常见的性传播感染 直接的皮肤-皮肤接触是传播的最有效途径 病毒不通过血液或体液传播（例如精液） .......... * HPV感染 生殖器HPV感染的潜伏期变化极大。一般来说，生殖器疣在HPV感染3-6月后显现，然而也有研究表明潜伏期有数个月甚至几十年； 绝大多数的HPV感染是一过性的，新发感染大多1-2年内会发生自愈； 仅有少数的HPV感染会保持潜伏性，几年或几十年后会再激活。 .......... * 多数生殖道HPV感染无临床症状 与HPV相关的宫颈疾病包括：宫颈湿疣、宫颈病变和宫颈癌等 从HPV感染到释放病毒约有3周。但是，HPV感染至出现损伤之间可能数周到数月。病毒感染的早期可能存在免疫逃逸，故没有炎症反应 .......... * 完整的HPV感染循环 HPV感染颗粒突破下