保健食品 急性毒性 啮齿类动物显性致死试验.pptx

啮齿类动物显性致死试验主讲：陈香郡啮齿类动物显性致死试验啮齿类动物显性致死试验概述试验目的和原理试验方法试验结果评价试验解释（一）概述遗传毒性作用—概述中华人民共和国国家标准—食品安全国家标准《啮齿类动物显性致死试验》（GB15193.9-2014），适用于评价受试物的致突变作用。标准中定义的显性致死突变：是指发生于生殖细胞的一种染色体畸变，这种遗传上的结构或数目改变并不引起生殖细胞（精子或卵子）的机能障碍，而是直接造成受精卵或发育期胚胎的死亡。（二）试验目的和原理显性致死试验显性致死试验是检测受试物诱发哺乳动物生殖细胞遗传毒性的试验方法，其观察终点为显性致死突变。致突变物可引起哺乳动物生殖细胞染色体畸变，以致不能与异性生殖细胞结合或导致受精卵在着床前死亡，或导致胚胎早期死亡。（二）试验目的和原理显性致死试验一般以受试物处理雄性啮齿类动物，然后与雌性动物交配，按照顺次的周期对不同发育阶段的生殖细胞进行检测，经过适当时间后，处死雌性动物，检查子宫内容物，确定着床数、活胚胎数和死亡胚胎数。如果处理组死亡胚胎数增加或活胚胎数减少，与对照组比较有统计学意义，并呈剂量-反应关系或试验结果能够重复者，则可认为该受试物为哺乳动物生殖细胞的致突变物。（三）试验方法显性致死试验1.受试物：应采用灌胃法，或用喂饲法；一般采用每天1次、连续5天的给予方式；如果认为其他方式合理，也可以采用，如一次性或连续3个月给予受试物。2.实验动物：动物品系应选择显性致死本底值低、受孕率高且着床数多、经生殖能力预试，受孕率在70%以上者，推荐使用小鼠或大鼠。应使用适当数目的雄性动物，雄鼠的数目应足以使每个交配周期每组产生30只～50只受孕雌鼠。每组雄鼠应不少于15只。（四）试验结果评价显性致死试验主要依据显性致死指标的结果进行判定：1.试验组与对照组相比较，胚胎死亡率（%）和（或）平均死亡胚胎数明显高于对照组，有统计学意义并有剂量-反应关系时，即可确认为阳性结果。2.若统计学上差异有显著性，但无剂量-反应关系时，则应进行重复试验，结果能重复者可确定为阳性。与此同时，应在综合考虑生物学意义和统计学意义的基础上做出最终评价。（五）试验解释显性致死是染色体结构畸变或染色体数目异常的结果，但也不能排除基因突变和毒性作用。因此，显性致死试验结果阳性，表明受试物对该物种动物的生殖细胞可能具有遗传毒性;显性致死试验结果阴性，表明在本试验条件下受试物对该种属动物的生殖细胞可能没有遗传毒性。显性致死试验谢谢观看