微生物应用基础 放线菌的分离筛选 演示文稿-放线菌的分离.ppt

微生物的菌种选育- 放线菌的分离筛选 放线菌菌落特征　　 放线菌的菌落由菌丝体组成。一般圆形、光平或有许多皱因种类不同可分为两类： 　　一类是由产生大量分枝和气生菌丝的菌种所形成的菌落。链霉菌的菌落是一类型的代表。菌落质地致密、表面呈较紧密的绒状或坚实、干燥、多皱，菌落较小而不蔓延；菌落与培养基结合较紧，不易挑起或挑起后不易破碎：幼龄菌落与细菌的菌落很相似，光滑或如发状缠结。有时气生菌丝呈同心环状，当产生大量孢子并布满整个菌落表面后，才形成絮状、粉状或颗粒状的典型的放线菌菌落；有些种类的孢子含有色素，使菌落有面或背面呈现不同颜色，带有泥腥味。 放线菌菌落特征 另一类菌落由不产生大量菌丝体的种类形成，如诺卡氏放线菌的菌落，粘着力差，结构呈粉质状，用针挑起则粉碎。若将放线菌接种于液体培养基内静置培养，能在瓶壁液面处形成斑状或膜状菌落，或沉降于瓶底而不使培养基混浊；如以震荡培养，常形成由短的菌丝体所构成的球状颗粒 放线菌培养条件 对放线菌的培养主要采用液体培养和固体培养两种方式。固体培养可以积累大量的孢子；液体培养则可获得大量的菌丝体及代谢产物。在抗生素生产中，一般采用液体培养，并在发酵罐中通入无菌空气，以增加发酵液的溶氧度。 采样方法 采样的方法，是在选好适当地点或场所后用无菌器具按照规范取样几十克，装人无菌的塑料袋或纸袋中，扎好，记录采样时间、地点、环境情况等，以备考证。一般土壤中芽抱杆菌、放线菌和霉菌的孢子忍耐不良环境的能力较强，因此不太容易死亡。但是由于采样后的环境条件与天然条件有着不同程度的差异，微生物必然逐渐减少，种类也会起变化，所以应尽快分离。 分离原理 分离放线菌常用稀释倒平板法。根据放线菌的营养、酸碱度等条件要求，常选用合成培养基或有机氮培养基。如果培养基成分改变，或土壤预先处理（120℃热处理1h），或加入某种抑制剂（如加数滴10%酚等），都可以使细菌，霉菌出现的数量大大减少，从而淘汰了其它杂菌。再通过稀释法，使放线菌在固体培养基上形成单独菌落，并可得到纯菌株。 分离所需材料 　药品：土样、可溶性淀粉、KNO3、NaCl、K2HPO4?3H2O、MgSO4?7H2O、FeSO4?7H2O、琼脂、重铬酸钾 器材：高压蒸汽灭菌锅、扭力天平、药匙、烧杯、量筒、玻璃棒、三角瓶、试管、牛皮纸、硫酸纸、线绳、无菌培养皿、铁锹、小铲、酒精棉球、镊子、玻璃铅笔。 高氏一号培养基的配制 K2HPO4 ?3H2O 0.125g，可溶性淀粉5g，硝酸钾0.25, MgSO4?7H2O0.125g， FeSO4?7H2O 0.025g，氯化钠0.125g，琼脂5g，水250ml。 配制时，先依次加入上述药品（除琼脂外）顺序溶解，加入无菌水至250ml，调节pH＝7.4，再加入琼脂不断搅拌震荡至溶化后， 121℃灭菌20分钟。 稀释涂布分离 稀释涂布分离 阅读引导文回答下面问题 什么是稀释涂布分离法？ 如何取到所需的土样？ End Thanks!