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微生物的菌种选育- 酵母菌的分离筛选 酵母菌菌落特征: 大多数酵母菌的菌落特征与细菌相似,但比细菌菌落大而厚,菌落表面光滑、湿润、粘稠,容易挑起,菌落质地均匀,正反面和边缘、中央部位的颜色都很均一,菌落多为乳白色,少数为红色,个别为黑色。 酵母菌的细胞形态: 酵母菌的出芽生殖模式: 酵母菌菌落形态: 分离酵母菌需要的设备 高压蒸汽灭菌锅、电炉、天平、铁架台、灭菌培养皿、锥形瓶、漏斗、试管、烧杯、胶头滴管、石蕊试纸、接种环、酒精灯、量筒、玻璃棒、纱布、滤纸、试管塞、报纸、扎绳、标签、温箱、冰箱、盖玻片、载玻片、显微镜、杜氏管 麦芽汁固体培养基的制备 (1)取一份麦芽粉加四份水,在65℃水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)。 (2)糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水20 m1,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)。 麦芽汁固体培养基的制备 (3)用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH至6.4。如当地有啤酒厂,可用未经发酵未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到10-15波林。 (4)加入2%琼脂,加热融化,补充失水。 (5)分装、加塞、包扎。 (6)高压蒸汽灭菌 0.1MPa灭菌20 min。 (1)取两块洁净灭菌的盖玻片,其中一块放置待分离的细胞悬液,另一块上滴加灭菌的稀琼脂培养基一滴,将两块盖片翻转,倒盖在湿室上。 (2)把湿室固定在显微镜载物台上,在显微镜下观察,将连在操纵器上的微针的前端调节到视野的中央,然后将微针降下。 (3)移动镜台推进器,将观察到的待分离的单细胞悬液也移至视野中央。 显微操纵法分离酵母单细胞 显微操纵法分离酵母单细胞 (4)将微针慢慢地升起至针尖再现在视野中,并轻轻拨离细胞,当有单细胞附着在针尖后,将微针降下。 (5)再移动推进器,将加有一滴稀琼脂培养基的盖片移动到针尖上方,慢慢升起微针,使针尖轻轻地接触培养基的表面,将单细胞从针尖上移接到培养基中。 (6)经观察确认单细胞已接在培养基中时,将盖片取下,于合适的条件下培养,即分得单细胞培养物。 1、光学显微镜下酵母菌细胞形态是什么样子的? 2、麦芽汁培养基上酵母的菌落形态怎样? 请阅读引导文,并回答以下问题: End Thanks!
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