体外溶血试验课件.ppt

体外溶血试验 目的 ? 观察注射剂的溶血反应，是 注射剂 的药物 安全性检查指标之一 原理 ? 取一定量药物加到 2% 兔血生理盐水中， 在一定时间范围内，观察 溶血 和 凝集 反应 情况 指红细胞膜破坏，或出现多数小 孔，或由于极度伸展致使血红蛋 白从红细胞流出的反应 一种血清学反应。颗粒性抗 原与相应抗体结合，在有电 介质存在的条件下，出现肉 眼可见的凝集小块。 材料 ? 动物：家兔 ? 器材：离心机、水浴锅、试管、离心管、 蒸馏水、生理盐水，供试药品。 方法： 1 、 2% 红细胞悬液的制备 ? 取家兔 1 只自耳静脉 采血 （或心脏采血） 10ml ，置放有玻璃珠的三角瓶中，轻 微搅拌 去除纤维蛋白 。 ? 将血移入有 5-10ml 生理盐水的离心管中， 混匀后 2500 r/min 离心 5min ，弃去上 清液，如此方法用生理盐水反复洗 3-4 次至 上清液呈无色透明 为止。 ? 将洗涤好的红细胞用生理盐水配制成 2% 的细胞悬液 ，备用。 方法： 2 、药物体外溶血测定 空白对照 阳性对照 结果判定 ? 全溶血： 溶液澄明红色，管底无红细胞残 留； ? 部分溶血： 溶液澄明或棕色，管底有少量 红细胞残留； ? 无溶血： 红细胞全部下沉，上层液体无色 澄明； ? 凝集： 不溶血，红细胞在试管底部凝集， 振摇后细胞不能分散 。 结论 ? 在 0.5h 出现部分溶血、全溶血，或出现凝 集反应的制剂，不能静脉内用药。 ? 在 3h 不出现溶血和凝集反应的制剂，判 断为溶血试验符合规定。