2.2动物细胞工程.pptxVIP

一、植物组织培养1、细胞全能性的概念？原因？2、细胞表现全能性的条件？3、植物组织培养的原理？过程？4、植物组织培养的培养基是 态 ，除必须的有机营养物质外，还需提供 。离体、完全营养、植物激素、无菌固无机盐、植物激素二、植物体细胞杂交1、在植物体细胞杂交实验中所用的技术手段有哪些？其理论基础是？2、如何去除植物细胞的细胞壁？3、人工诱导原生质体融合的方法？4、原生质体融合成功的标志是？5、植物体细胞杂交技术的意义?6、植物细胞工程应用于哪些方面？细胞膜的流动性，细胞全能性 植物细胞融合，植物组织培养 克服远缘杂交不亲和的障碍24日下午，中国科学院神经科学研究所的孙强团队宣布，成功克隆出了两只食蟹猴。这是世界首个体细胞克隆猴。人类首次通过体细胞核移植的方式克隆出来的灵长类动物。 克隆猴的到来给未来更多可能性从落后到并跑，如今领先世界而我们，有幸见证了一个伟大时代的开始，更可以期待一个更加美好的未来。2.2 动物细胞工程常用的技术手段： ★动物细胞培养 ★动物细胞核移植 ★动物细胞融合 ★单克隆抗体的制备（基础）一、动物细胞培养 1.动物细胞培养的概念 从动物机体内取出相关组织，将它分散成单个细胞，放在适宜的培养液中，让这些细胞生长和增殖。细胞的增殖2.动物细胞培养的原理：3.培养过程（理解细胞贴壁、接触抑制、原代培养、传代培养新概念）细胞贴壁:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上。培养贴附性细胞时,细胞要能贴附于底物上才能生长繁殖.细胞接触抑制 细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。（动物胚胎或幼龄动物的组织、器官）胰蛋白酶或胶原蛋白酶剪碎原代培养50代细胞过程：取材使细胞充分接触培养液，更容易进行物质交换（可用胃蛋白酶吗？）单个细胞加培养液动物组织细胞间隙中含有一定量蛋白质细胞悬液从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。10代细胞重新用胰蛋白酶处理贴壁细胞传代培养将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养无限传代4.动物细胞培养的条件⑴无菌、无毒的环境 培养液、用具无菌处理；培养液中加抗生素； 定期更换培养液（防止细胞代谢产物积累对细胞的毒害） ⑵营养培养液：水、无机盐、葡萄糖、氨基酸、微量元素、维生素、促生长因子、动物血清（血浆） ⑶适宜的温度和pH与植物组织培养中所用培养基的区别？补充合成培养基中所缺的成分，如生长因子哺乳动物：T:36.5±0.5℃ pH:7.2~7.4⑷气体环境（95%空气+5%CO2） O2：有氧呼吸等细胞代谢必需的 CO2:维持培养液的pH动物细胞培养的应用 （1）生产蛋白质生物制品： 病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等 （2）基因工程受体细胞的培养（3）用于检测有毒物质（根据变异率）（4）用于生理、病理、药理等方面的研究（5）培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植1.动物核移植的概念： 将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。2、原理：动物细胞的细胞核具有全能性。用核移植方法得到的动物称为克隆动物。胚胎细胞核移植、体细胞核移植3、过程：卵母细胞采集、培养MⅡ期卵母细胞去核去核卵母细胞电激处理使供体核进入受体卵母细胞构建重组胚胎供体细胞注入去核卵母细胞代孕母牛克隆牛体细胞培养供体牛体细胞核移植过程（体细胞克隆动物）胚胎移植1、受体细胞为减数第二次分裂中期的卵母细胞的 原因？卵母细胞比较大，易操作；细胞质中含有使体细胞核全能性表达出来的物质2、供体牛一般选传代10代以内的细胞，为什么？保证正常的二倍体核型，以保证供体细胞正常的遗传基础3、克隆过程运用的技术手段？动物体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植4、克隆牛的大部分性状与谁一样？完全一样吗？供体牛细胞质中的遗传物质；环境5、此技术的繁殖方式属于？无性繁殖体细胞核移植技术的应用前景1.加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育2.保护濒危物种3.转基因克隆动物作为生物反应器，产医用蛋白4.用于组织器官的移植5.了解胚胎发育及衰老过程6.用克隆动物做疾病模型，追踪研究疾病发展过程，治疗疾病体细胞核移植技术存在的问题1.成功率非常低2.绝大多数克隆动物还存在健康问题，如体型过大，异常肥胖，发育困难，免疫失调等3、克隆动物食品的安全性问题获得细胞或细胞分泌蛋白动物细胞培养植物组织培养细胞增殖原理植物细胞的全能性培养基性质固体培养基液体培养基培养基特有成分蔗糖、植物激素葡萄糖、动物血清培养结果植物体或组织细胞株、细胞系快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的细胞增殖1、动物细胞培养的原理是动物细胞的全能性（ ）2、简述动物细胞培养的过程？2、培养动物细胞时，需