寄生虫常见诊断的方法.ppt

寄生虫病诊断的常用方法 、病原学诊断方法 许多寄生虫,特别是寄生于消化道的虫体, 其虫卵、卵囊或幼虫均可通过粪便排出体 外,通过检查粪便,可以确定是否感染寄 生虫或确定寄生虫的感染强度。 粪便虫卵检查法 1.直接涂片法 2.漂浮集卵法 3.沉淀集卵法 4.麦氏计数法 ●5.毛蚴孵化法 1.直接涂片法 direct smear method ●直接涂片法是取50%甘油水溶液或普通水 1~2滴滴于载玻片上,镊取黄豆大小的被检 粪块与之混匀,剔除粗粪渣,抹薄涂匀, 盖上盖玻片镜检。本法最为简便,但检出 率不高。为提高阳性检出率,每个样本应 检多片 2.漂浮集卵法 flotation method 应用比重较虫卵大的漂浮液,使蠕虫卵、球虫卵囊等浮于 液体表面,易于集中检查。漂浮集卵法对某些线虫卵、绦 虫卵和原虫卵囊有很好的检出效果。缺点是高比重的漂浮 液易使虫卵和卵囊变形,检查时必须迅速,也可在制片时 补加一滴清水。 常用方法为饱和盐水漂浮法。取5~10g粪便置于200m烧 杯中,先加入少量饱和盐水(1L水中加食盐400g),搅 拌混合后再加入约20倍的漂浮液,用金属筛或纱布滤去粪 渣,滤液静置30~60min,用直径0.5~10cm的金属圈蘸 取表面液膜,抖落于载玻片上,加盖片后镜检。 检查比重较大的虫卵,如棘头虫虫卵、猪肺丝虫虫卵及吸 虫卵时,需用硫酸镁、硫代硫酸钠以及硫酸锌等饱和溶液。 3.沉淀集卵法 sedimentation method 用水处理粪便,经离心或自然沉淀,使虫卵沉淀 集中,更易芋检查 ●自然沉淀集卵法是取粪便5~10gq加水混合成悬浮 液,经40~60孔2.54cm2铜筛滤去大块物质,静 置15min后倾去上清液,如此反复操作,直至上层 液体透明为止最后弃去上层液体,置沉淀物于载 玻片上,镜检虫卵。 离心沉淀法是取1~2g被检粪便于试管中,加5倍 量的水制成悬浮液,经40孔/cm2铜筛过滤到一离 心管中,以80orpm离心3~5min,弃上清,将沉渣 置载玻片上,镜检虫卵。 ●本法也适用于检查尿液内的虫卵。 4.麦氏计数法 MacMaster method 是常用的虫卵计数方法之一。通过虫卵计数,可 以估计动物感染强度。 取粪样2g放入三角烧瓶内,加饱和盐水58m和玻 璃珠若干,充分震荡使成混悬液,吸取混悬液注 入麦氏计数室,置显微镜下计数计数室(1cm2 内虫卵数。由于每室混悬液等于015m,结果乘以 200,即为每克粪便虫卵数。通常一次计数4室,然 后按平均值计。本法只适用于可被饱和盐水漂起 的各种虫卵。 5.毛蚴孵化法 hatching test 是诊断日本血吸虫及东毕吸虫的方法之一。其依据是血吸 虫卵内的毛蚴在适宜的的条件下能很快孵出,并基本上按 直线运动于水面下,利用这一特性检查毛蚴即可确诊 取被检粪便30~100g(牛100g)经沉淀集卵法处理,将 沉淀倒入500ml三角烧瓶内,加温清水(自来水需脱氯处 理)至瓶口,置22~-260C孵化,第1、3、5h,用肉眼或 放大镜观察并记录一次。如见水面下有白色点状物做直线 来往运动,即是毛蚴,但需与水中一些原虫如草履虫、轮 虫等相区别。必要时吸出在显微镜下观察。气温高时,毛 蚴孵岀迅速,因此,在沉淀处理时应严格掌握换水时间, 以免换水时倾去毛蚴造成假阴性结果。也可用1.0%~1.2% 食盐水冲洗粪便,以防止毛蚴过早孵出,但孵化时应用清 水 体表虫体检查法 寄生于动物体表的寄生虫主要有蜱、螨、 虱等。对于它们的检查,可采用肉眼观察 和显微镜观察相结合的方法。 蜱寄生于动物体表,个体较大,通过肉眼 观察即可发现。 螨和虱有些个体较小,常需刮取皮屑,于 微镜下寻找虫体或卵。 刮取皮屑的方法甚为重要,应选择患病皮肤与健 康皮肤交界处,这里的螨较多。刮取时先剪毛, 取凸刃小刀,在酒精灯上消毒,使刀刃与皮肤表 面垂直,刮取皮屑,直到皮肤轻微出血(此点对 检査寄生于皮内的疥螨尤为重要)。蠕形螨病 可用力挤压病变部,挤出脓液,将脓液摊于载玻 片上供检查。 将刮下的皮屑,放于载玻片上,滴加50%甘油溶 液,覆以另一张载玻片。搓压玻片使病料散开 分开载玻片,置显微镜下检查。