微生物育种技术 项目一 工业菌种的分离、单元六 工业菌种的分离与纯培养技术、微生物育种技术 单元六 项目一.ppt

单元六 工业菌种的分离和纯培养技术 项目一 工业微生物菌种的分离技术 任务一 无菌技术 防止实验操作过程中其被其他微生物污染，其自身也不污染操作环境的技术。 实验操作过程：分离、转接、培养纯培养 物等。 1 微生物培养的常用器具及其灭菌 培养皿 试管 三角瓶 塞子 灭菌（让容器内不含任何生物） 2 无菌接种操作 最常用的基本操作。 要点： 在火焰附近熟练操作； 在无菌操作箱操作； 在无菌操作室（无菌间）操作。 接种环 接种针 无菌吸管 移液枪 3 获得纯培养的方法 固体培养基 液体培养基 固体培养基 培养平板（culture plate）或平板（plate） 菌落（colony） 试管 菌苔（lawn） 获得 获得 菌落 菌 苔 液体培养基 沉淀生长 混浊生长 表面生长 平板划线分离法 稀释法 单胞子或单细胞分离法 利用选择性培养基分离法 任务二 纯培养物分离方法 稀释法 稀释倒平板法:菌悬液稀释—不同梯度的稀释液少许与培养基混合—摇匀—倒培养皿中 稀释混合平板法：稀释—培养皿中加入不同梯度的菌悬液1mL—加45℃左右的培养基—摇匀 稀释涂布平板法：倒平板----稀释----接种0.1mL—涂布 单胞子或单细胞分离法 采取显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培养的方法。 操作技术要求比较高，要用显微操作仪或特制毛细管 利用选择性培养基分离法 利用选择培养基直接分离 根据待分离微生物的特点选择不同的培养条件。通过物理或化学手段使目的微生物能很好生长，其他微生物不易生长的条件筛选分离 如筛选蛋白酶产生菌 富集培养 富集培养 不同微生物间生命活动特点不同，制定特定的环境条件，使仅适应于该条件的微生物生长旺盛，而使其在群体中的数量大大增加，更易分离出特定微生物 富集培养的条件可根据所需分离微生物的特点，从物理、化学、生物及综合因素等多个方面进行选择，如温度、pH值，紫外线、压力、光照、氧气、营养等 富集培养时，需设计基础培养基 几种分离方法的应用范围 划线：简便，用于分离 稀释倒平板法：分离、计数 单细胞挑取法：高度专业 选择培养：分离生理类型特殊的微生物