生物制药与药品检验技术 好喝又好玩—酪蛋白的提取制备与性质鉴定（任务一） 课件：牛奶中酪蛋白的提取制备与性质鉴定.pptx

;项目二 多肽类药物的原料制备与质量检验;实训 酪蛋白的提取制备与性质鉴定;一、实训目的;二、实训意义;三、实训准备;试剂： 0.2mol/L 醋酸－醋酸钠缓冲液（pH4.7） 10％氯化钠 0.5％碳酸钠 1mol/L氢氧化钠 0.2％盐酸 饱和氢氧化钙 3％醋酸铅;思考题： 为何用醋酸-醋酸钠缓冲液调节牛奶的pH至4.7？ 分别用水、乙醇、无水乙醚洗涤酪蛋白沉淀的目的？洗涤顺序是否可以调换？ 你认为制备成功的关键点有哪些？ 能预判酪蛋白在不同溶液中的溶解性吗？ ;四、实训步骤;步骤一：鲜奶中酪蛋白的分离制备 （1）取50mL牛奶加热到40℃，搅拌下慢慢加入预热到40℃、pH4.7的0.2mol/L 醋酸－醋酸钠缓冲液50mL（搅拌5 min）。pH试纸检验，最后pH4.7。 （2）冷却放置5min，离心10 min（4000r/min）。沉淀为酪蛋白粗制品。;（3）水洗涤沉淀1次：沉淀中加入50mL左右的水（用玻璃棒将沉淀充分打碎），离心10 min（4000r/min），弃去上清液。 洗去什么样的杂质？ ;（4）乙醇、无水乙醚洗涤沉淀（脂溶性杂质）： 1 ）沉淀中加入40mL 95％乙醇，搅拌片刻（尽可能把沉淀充分打碎）。 将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。 2 ）用40mL无水乙醇-无水乙醚混合液（1：1）洗涤沉淀1次，抽干。 3 ）最后用40mL无水乙醚洗沉淀1次，抽干。 ;（5）将沉淀摊开在培养皿（先称重）上，风干，得酪蛋白纯品。 ;步骤二：酪蛋白的性质鉴定 溶解度：取试管6支，分别加水、10％氯化钠、0.5％碳酸钠、0.1mol/L氢氧化钠、0.2％盐酸及饱和氢氧化钙溶液各2mL。于每管中加入极少量酪蛋白（尽量每管等量）。不断搅拌，观察并记录各管中的酪蛋白溶解度。;步骤三：计算酪蛋白的质量浓度和得率 （1）计算酪蛋白实际的质量浓度 以1L牛奶中酪蛋白的质量（g）表示：收获的酪蛋白质量/体积（50mL，0.05L） （2）计算得率 酪蛋白得率/％ ＝酪蛋白实际质量浓度 ×100　　　　 酪蛋白理论质量浓度 式中：酪蛋白的理论质量浓度为35g/L 注意：酪蛋白不纯，酪蛋白未干燥完全，培养皿未干燥完全，则得率可能大于100% ;五、注意事项;六、安全提示;七、实训小结