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兽医实验室诊断技术 主讲:汤起武 百年生机 为时养器 血凝和血凝抑制实验CONTENTS 01 血凝实验 02 血凝抑制实验 原理 Part-1 血凝实验 一 血凝与血凝抑制实验(禽流感和鸡新城疫): 用已知抗原来检测被检血清中有无相应的特异性抗体和滴定该特异性抗体的水平。 血凝试验:某种病毒的血凝素,能使鸡、鹅或人的红细胞发生凝集,叫做血凝试验,也称直接血凝反应,利用这种特性设计的试验称血凝试验 (HA) 。 常见于正粘病毒(禽流感)、副粘病毒(新城疫)和某些黄病毒、痘病毒等。 目的:测定病毒的血凝效价,通常采用4个血凝单位 血凝实验 一 刺突:亚型特异性抗原,易变异 血凝素(HA,从H1—H15):呈柱状 功能: ①吸附细胞:与细胞上受体结合,使病毒侵入细胞 ②凝集多种动物的红细胞(血凝试验) ③具抗原性:其抗体能中和病毒---中和抗体抑制血凝(血凝抑制试验) 血凝素(HA) 柱状 原理 一 血凝实验(HA)原理 血凝抑制实验 Part-2 血凝抑制实验 二 血凝抑制试验: 当病毒的悬液中先加入特异性抗体,且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素,则红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或其血凝素直接接触。这时红细胞的凝集现象就被抑制,称为红细胞凝集抑制反应,也称血凝抑制反应,利用这种特性设计的试验称血凝抑制试验 (HI) 。该试验是目前WHO进行全球流感监测所普遍采用的试验方法。 目的: 检测有无病毒感染和免疫状态。 血凝抑制实验 二 血凝抑制试验(HI)原理: 病毒的悬液中加入特异性抗体,红细胞的凝集现象被抑制,称为红细胞的血凝抑制。 操作方法 二 血凝抑制试验结果判定 以完全抑制红细胞凝集的血清最大稀释度为该血清的HI滴度(注:看结果时96孔板倾斜45度)。 确定度数的孔要与前一孔的流速及形状完全一样,即泪珠样流挂。读数要快,可以读到结束,一组(一板)时间不要超过30秒。 操作方法 二 血凝抑制效价: 能完全抑制红细胞凝集的最高血清稀释度即为血清的血凝抑制效价 临床意义: 禽流感:免疫21天后HI抗体 效价≥4为免疫合格 鸡新城疫:免疫21天后,抗 体效价≥5判定为合格 感谢您的观看 * *
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