畜禽繁育技术 畜禽繁育技术 115胚胎采集.ppt

牛用采胚三通管 采胚管试气漏气 冲卵液EMCARE 冲卵液AB公司 牛冲卵液体回收用具 羊子宫角冲胚示意图 胚胎采集与胚胎鉴定 一、牛胚胎采集（非手术冲胚） 二、羊胚胎采集 胚胎采集与胚胎鉴定 一、牛胚胎采集（非手术冲胚） 1．冲胚时间 牛冲胚一般安排在第1次输精后第7 ±0.5 d进行非手术法冲胚。此时胚胎已经进入子宫角上端。而第9天部分胚胎已孵出透明带，不利于鉴别、分离和操作。 一、牛胚胎采集（非手术冲胚） 2．冲胚步骤 （1）供体牛的保定和麻醉 保定架前部增加临时的木架，高20-30厘米，使牛的前驱抬高，增加腹压减少直肠空腔。掏出直肠内粪便，清洁外阴及后躯。冲胚前先检查黄体数，估算可收集胚胎数。 一、牛胚胎采集（非手术冲胚） 2．冲胚步骤 （1）供体牛的保定和麻醉 在第一、二尾椎骨之间硬膜外腔麻醉，麻醉剂用盐酸普鲁卡因或利多卡因2～10ml，肌肉注射静松灵1～1.5ml。 图 尾椎麻醉位置示意图 一、牛胚胎采集（非手术冲胚） 2．冲胚步骤 （2）冲胚管的插入 。用直肠把握子宫颈法操作，将冲胚管通过子宫颈，先进入排卵较多一侧的子宫角，钢芯反复引导至小弯处，充起气囊固定冲胚管。依子宫大小及冲胚管在子宫内位置的深浅，注入8～20ml空气。冲胚管的插入位置和气囊的充气合适度是胚胎采集成功的关键，冲胚管送达子宫角小弯处通过向气囊注入一定量的气体将膨胀的气囊卡在子宫角内壁将其固定，并使子宫角和气囊之间形成一个封闭的空间，可实施冲胚操作(图)。 一、牛胚胎采集（非手术冲胚） 2．冲胚步骤 图 牛非手术法冲胚示意图 1．气囊充气2．注入冲卵液3．硬膜麻醉4．冲胚管的气囊位置 5．子宫颈6．回收冲胚液 一、牛胚胎采集（非手术冲胚） 2．冲胚步骤 （3）冲胚时应注意，前1～2次冲卵液的回收很关键.子宫角不要充液太满，以后液量逐渐增加。每次轻缓地按摩子宫角（图4-5-11），力争彻底回收，应回收90％～lOO％注入子宫的液体。一侧冲洗5～6次，约消耗400ml冲洗液(杜氏磷酸缓冲液-PBS，表)。冲胚时要考虑到母牛发情1周后胚胎主要集中在子宫角顶端，每次冲洗液应到达子宫角深部，使冲洗过程对供体母牛的应激和损伤减至最小程度。一侧冲洗结束后，放掉气囊中的气体，插入钢芯，将集卵管退至子宫体，再伸人另一侧子宫角，重复以上操作。 一、牛胚胎采集（非手术冲胚） 2．冲胚步骤 （3）提起子宫角 一、牛胚胎采集（非手术冲胚） 2．冲胚步骤 （3） 成分 相对分子质量 称重(g) 三蒸馏水(ml) NaCI KCl Na2HPO4 KH2PO4 牛血清白蛋白 葡萄糖 丙酮酸钠 抗生素 CaCl2 MgCl2·6H2O 58.44 74.65 141.96 136.09 180.16 110.04 110.99 203.31 8.OO 0.20 1.15 O.20 3.00 1.OO 0.036 O.20 O.10 0.10 800(I) 100(II) lOO(III) 表 改进的杜氏磷酸缓冲液成分 一、牛胚胎采集（非手术冲胚） 2．冲胚步骤 （4）冲胚结束后，立即向供体子宫内输注青链霉素溶液，同时肌注PG 2支，PG注射后2-3天观察发情，适时实施人工授精配种。 二、羊胚胎采集 1．采胚前的准备 （1）羊手术室和胚胎操作室的准备 （2）手术器械及相关物品准备 （3）手术羊的准备 （4）术前人员分工 2.手术冲胚 （1）子宫角冲胚法 （2）输卵管冲胚法 （3）缝合 3.供体羊手术后的处理 二、羊胚胎采集 1．采胚前的准备 （1）羊手术室和胚胎操作室的准备 手术室应配备照明用电和取暖用电。室内温度15℃～25℃，光线充足，无尘。地面用水泥或瓷砖铺成便于清洗和消毒。门窗密闭性应好，门下框采用无障碍设计。 在手术室内或隔壁设专门套间作为检胚室，检胚室安装小推拉窗与手术室相通。检胚室内温度20℃ ～ 25℃，室内无尘，相对湿度40% ～ 60%。 手术前12小时，用紫外线消毒灯照射2小时后密封待用。手术过程中不应随意开启门窗，地面用1% ～ 2%新洁尔灭消毒。 二、羊胚胎采集 1．采胚前的准备 （2）手术器械及相关物品准备 ①新买的手术器械清洗后烘干用新洁尔灭浸泡30分钟； ②非一次性使用的如敷料、创巾、手术衣帽和口罩等物品，都需用棉制品，回收时均需要洗涤干净，不得粘有被毛或其他污物，然后按不同规格分类