第9章 病毒的遗传分析.ppt

每一杂交得到一连锁图： ra 24.0 h rb 12.3 h rc 1.6 h 三种不同的重组值，表示三个r基因的座位是不同的，所以有4种可能的连锁图： ra rb rc h ra rb h rc ra rc h rb ra h rc rb 确定四个基因的排列顺序时，首先只考虑rb，rc和h，进行rc－rb+×rc+rb－的杂交，得到的重组值与rb-h间的距离进行比较，若rc-rb＞12.3=rb-h，则h位于中间，即排列顺序为rc-h-rb。 剩下的是ra在h的哪一边？答案是ra-rc-h-rb和rc-h-rb-ra都正确，因为T2噬菌体的连锁图也是环状的。 h rc rb ra 图 T2的连锁图，只注明4个基因 三、λ噬菌体的三点测交与作图 Kaiser在1955年最早进行了λ噬菌体的重组作图试验。他用紫外线照射处理得到5个λ噬菌体的突变系： s 系：产生小噬菌斑 mi系：产生微小噬菌斑 c 系：产生完全清亮的噬菌斑 co1系：产生除中央一个环之外其余部分都清亮的噬菌斑。 co2系：产生比co1更浓密的中央环噬菌斑。 Kaiser用s co1 mi×＋＋＋杂交，后代有8种类型。病毒是单倍体，与二倍体生物不同，亲本组合与重组交换的组合可直接从后代中反映出来。8个类型中数目最少的两种类型就是双交换的结果，频率最高的两种是亲本类型，其余的为单交换类型。 表4 λ噬菌体s co1 mi×＋＋＋杂交结果及重组值计算 表现型 数目 占总数比例/% 重组值/% s-co1 co1-mi s-mi ＋＋＋ 975 90.82 　 　 　 s co1 mi 924 　 　 　 s＋＋ 30 2.97 √ 　 √ ＋ co1 mi 32 　 s co1 ＋ 61 5.35 　 √ √ ＋＋ mi 51 　 s ＋ mi 5 0.86 √ √ 　 ＋ co1 ＋ 13 　 合计 2091 100 3.83 6.21 8.32 从双交换的类型可知，这3个基因的次序就是s－co1－mi。s与co1的图距应为3.83cM；co1 与mi之间则为6.21cM；因为有双交换的存在，s与mi之间的图距则为8.32＋2×0.86＝10.04(cM)。 3个基因的遗传图： s co1 mi 3.83 6.21 虽然将真核生物中两点测交和三点测交的基本原理和方法应用于噬菌体杂交，但是两者在杂交机制上是完全不同的： ①噬菌体在杂交中，每个亲代对子代所提供的遗传贡献取决于感染细菌时每种亲代噬菌体的相对数量。如基因型A与基因型B的亲代比＝10：1，则产生重组子代的数量A型常多于B型子代数。 ② 噬菌体的基因重组发生在噬菌体的DNA复制以后，因此从单个混合感染的细菌中可以得到亲代噬菌体和重组噬菌体； ③ 噬菌体不同基因型之间可以发生多次交换； ④ 在噬菌体中基因重组率可以随着宿主细胞裂解时间的延长而增加。 因此噬菌体杂交时，应该注意： ① 控制每种亲代噬菌体基因型的投放量。 ② 控制允许发生复制和重组的时间。 第四节 噬菌体突变型的互补测验 一、互补测验与顺反子 二、基因内互补 一、互补测验与顺反子 重组测验是以遗传图距的方式确定基因的空间关系，而互补测验则是确定突变基因的功能关系。 1957年Benzer以大肠杆菌T4噬菌体为材料，通过互补实验，在DNA分子水平上