病理检验技术、教学服务模块 7.染色封片、教学课件 组织切片的染色—苏木精-伊红染色的染料的配置方法及染色特点.pptx

病理检验技术;常规组织病理技术 ;一、常用苏木精染液的配制方法及染色特点 1.改良?Lillie-Mayer苏木精染液 （1）材料苏木精(hematoxylin) 5g无水乙醇(absolute?alcohol) 50ml硫酸铝钾(aluminium?potassium?sulphate) 50g蒸馏水 650ml碘酸钠(sodium?iodate) 500mg甘油（glycerine） 300ml冰醋酸（glacial acid） 20ml; （2）配制操作：分别将苏木精溶于无水乙醇，硫酸铝钾溶于蒸馏水（可加热至40~50℃，使硫酸铝钾更容易溶解），用玻璃棒轻轻搅动使彻底溶解，待恢复至室温后，与苏木精无水乙醇液充分混合，再加入碘酸钠，最后加入甘油和冰醋酸。 配制中与原法的区别：原法材料没有无水乙醇，为使苏木精快速彻底溶解，改良法加入无水乙醇50m1来溶解苏木精，并相应减少50m1蒸馏水；原法用碘酸钠200～400mg，改良法用500mg，以加强其氧化作用。; （3）染液特点：染液无氧化膜形成，可使用较长时间，细胞核染色质着染较深而细微。新配好的染液染色时间约5～8分钟，使用1周后苏木精染液进一步成熟，染色时间约为3～5分钟即可，故染液最好提前3～5天配制。由于不需要每天用前除去氧化膜，特别适合用于染色机染色。 目前已多用此液代替 Harris苏木精液用于临床病理制片染色。 ;一、常用苏木精染液的配制方法及染色特点 2.Harris苏木精液 （1）材料 苏木精(hematoxylin) 5g无水乙醇(absolute?alcohol) 50ml 硫酸铝钾(aluminium?potassium?sulphate 100g蒸馏水 1000ml氧化汞(mercure?oxide) 2.5g; （2）配制操作：分别将苏木精溶于无水乙醇，硫酸铝钾溶于蒸馏水(加热煮沸溶解)，然后将两液均匀混合，此时染液为淡红色。继续加热煮沸后即取出，待30秒后慢慢加入氧化汞（不要一下子全部倾入，否则会引起染液向上喷溅伤人），此时染液呈深紫色，立即置入冰水中（要事前准备好），使染液迅速冷却（以防氧化汞在高温中过度氧化苏木精），冷却至室温后过滤即可用。; （3）染液特点：染液对细胞核染色较深，染色需时较短，约4～6分钟，适用于临床病理制片染色。不足之处是配制时操作烦琐，在高温的苏木精液加入氧化汞时要特别小心,氧化时间不好掌握。染液配好后, 染液面上经常形成一层氧化膜，每天染色前需过滤或用纸刮去，否则极易污染切片；染液保存时间不长，约可使用数周。 ;改良Harris苏木精液： 染液所用硫酸铝钾量较多，已接近饱和，在室温较低时，常有结晶析出，可将硫酸铝钾量减少1/3。原配方没有冰醋酸，如在染液中加冰醋酸40ml，既可加强细胞核的选择性染色，又可延缓染液的氧化。加酸后的Harris苏木精液，其染色时间约5～8分钟。有学者认为，为了避免氧化膜的形成，可改用碘酸钠代替氧化汞作为氧化剂，以降低对苏木精氧化，其染色效果也很好，称为改良Harris苏木精液。;一、常用苏木精染液的配制方法及染色特点 3.Mayer苏木精染液 （1）材料 苏木精(hematoxylin) 1g 蒸馏水 1000ml 碘酸钠(sodium?