病理检验技术、教学服务模块 （一）组织的特殊染色、课件 酶类—非特异性酯酶.pptx

病理检验技术;特殊染色;非特异性酯酶 非特异性酯酶(non- specific esterase)、 脂酶( lipase)、 胆碱酯酶( cholin-esterase)。 一般来说,非特异性酯酶能水解短链脂肪酸(C2~C4）的酯, 脂酶能水解长链脂肪酸(C8以上)的酯, 胆碱酯酶能水解胆碱的酯键。 狭义的酯酶多指非特异性酯酶， 广义的酯酶有时包括脂酶和胆碱酯酶。 ;非特异性酯酶 ;非特异性酯酶 ;非特异性酯酶 ;非特异性酯酶（酸性乙酸-α-萘酯-六偶氮对品红法） ;非特异性酯酶 ; (四)注意事项 1. 如仅显示单核细胞,孵育10分钟已足够, 如显示T淋巴细胞,则需1-2小时,至肉眼见切片呈淡棕色时取出于镜下观察效果。 2. 4%的对品红盐酸配制后塞紧置4℃的冰箱保存,可使用1年以上。4%的亚硝酸钠不能保存,应于临用前配制,需多少配多少。 3. 用1%的甲基绿染胞核前,切片应晾干,湿的切片不易着染甲基绿。 ; (五)染色机制 切片内的非特异性酯酶在酸性环境下(pH5.8~6.2)将乙酸-a-萘酯水解,分解出a-萘酯和乙酸,前者与六偶氮对品红偶联生成棕红色至深棕色的不溶性复合物沉淀在酶活性部位而显示出来。 ;(六)应用 单核巨噬细胞含非特异性酯酶最丰富,其胞质呈弥漫性强阳性,故可用以检测单核巨噬细胞,也可用以区分T淋巴细胞和B淋巴细胞,T淋巴细胞及其肿瘤细胞呈局限性点状阳性,B淋巴细胞呈阴性,在实验室未开展免疫组化和无单克隆抗体时,用此法有一定实用价值。