病理检验技术、教学服务模块 5.浸蜡包埋、教学课件 病理组织的包埋—病理组织的包埋.pptx

病理检验技术常规组织病理技术 病理组织的包埋 病理组织的包埋一、组织包埋的概念 组织块经过固定、脱水、透明、浸蜡等处理后，用包埋剂(如石蜡、明胶、火棉胶、环氧树脂、塑料等)将其包制成含组织块的蜡块或塑料块等的过程称为包埋。 二、组织包埋的目的 不同的包埋方法有不同的要求，经包埋后，组织可达到一定的硬度和韧度，有利于切成理想的薄片。病理组织的包埋 三、常用组织包埋剂的种类和特性 1.石蜡：是从石油中分离出来的一种碳氢化合物，呈半透明的结晶状物质，无味无臭,不溶于水及乙醇，易溶于甲苯、二甲苯和三氯甲烷。石蜡有不同的硬度，其硬度是根据熔点的高低来决定。熔点高则硬度大，熔点低则硬度小，硬度的大小是取决于其分子结构的含碳量，含碳越多，硬度越大；含碳越少，硬度越小。病理组织的包埋 三、常用组织包埋剂的种类和特性 石蜡的选择： 1.白色质纯，无气泡和杂质，有适度的黏韧性，凝固后的石蜡有一种透亮的光泽。 2.在制片上，根据需要不同分为软蜡(熔点约在50~54℃)和硬蜡(熔点约在56~60℃)，软蜡多用于组织浸透，硬蜡多用于组织包埋。 3.包埋用硬蜡要依据室温的高低来选用。在夏季室温高时可选用熔点较高的硬蜡，在冬季室温低时可选用熔点较低的硬蜡。病理组织的包埋 三、常用组织包埋剂的种类和特性 石蜡的选择： 在一般情况下，如采用的石蜡太硬，切片时容易破碎，不易切成蜡带；反之，如采用的石蜡太软时，切片常皱缩，难成蜡带，贴片时也难把切片摊平。 目前使用的切片石蜡有国产和进口的专用切片石蜡，国产切片石蜡价格便宜，进口的价格较贵。由于进口的切片石蜡在石蜡内加入一定量的特种塑料聚合物和二甲基亚砜等添如剂，使石蜡的韧性大，,用这种石蜡包埋，能切成薄至1～2um厚的组织切片，不容易皱缩或破碎和裂开，还能增加石蜡渗透组织的能力，是目前较为优质的切片石蜡。 病理组织的包埋 三、常用组织包埋剂的种类和特性 2.火棉胶：是无色或淡黄色的透明胶状液体，有醚的气味，市售多为4%～8%的溶液。有一种固体的火棉胶呈透明的片块状，用时可剪碎称量后用等量无水乙醇和乙醚配成自己需要的浓度即可。火棉胶浸透常采用三种浓度倍增法，即采用4%、8%和16%三种，也有采用5%,10%和20%三种，主要根据胶黏度的高低来决定，组织浸胶时间每种浓度约2～3天，包埋时用16%或20%火棉胶。 病理组织的包埋 三、常用组织包埋剂的种类和特性 火棉胶液的特性：密封保存，易挥发易潮吸入水分；遇甲醛极易硬固；易燃；浸透慢。临床多用于眼球和肺组织的制片以及特殊的科研标本制片。火棉胶包埋和切片与石蜡包埋和切片的原理基本一样,但在操作上稍有不同,因临床病理制片较少应用,故不作详细介绍。病理组织的包埋 四、石蜡包埋的方法 包埋工具：目前较为常用的是塑料包埋盒(脱水盒)与金属包埋模具两者配套使用。塑料包埋盒为国际统一规格，包埋模具一般是用不锈钢压铸而成，根据所包埋组织块的大小其规格分为6mm×6mm、20mm×20mm、24mm×24mm和24mmx×37mm四种。 过去常用的包埋工具为长条形(内分五框格)、田字形(内分四框格)包埋框。 病理组织的包埋四、石蜡包埋的方法 组织包埋的方法：包埋时把不锈钢包埋模具放在自动包埋机的出蜡嘴下方，注入熔化石蜡，掰开塑料包埋盒盖片，立即用小镊子(眼科镊)把组织块放入不锈钢包埋模具，并用小镊子把组织轻轻按平，随即用小镊子将该例塑料包埋盒安放在不锈钢包埋模具上，再注入熔化石蜡少许，最后放在自动包埋机的冷冻台上凝固，使石蜡和塑料包埋盒粘合牢固，脱出包埋模具。 病理组织的包埋五、石蜡包埋的注意事项 1.包埋时,蜡缸的温度应比石蜡的熔点高4～6℃。 2.包埋石蜡与组织浸蜡剂的温差不能过大。 3.组织包埋时按最大最平的切面或有病灶的一面向下包埋。管腔、囊壁、皮肤等层次清楚的应竖埋,使切片染色后在镜下能看到各层次组织结构。如皮肤要有表皮和真皮或皮下组织,肠壁和胃壁要有黏膜、黏膜下层、肌层和浆膜层,肾脏要有皮质和髓质等。内镜小活检组织(如胃、直肠和膀胱黏膜)用滤纸定位,与滤纸附着点是黏膜的基部,因此,需顺转90°角包埋。病理组织的包埋五、石蜡包埋的注意事项 4.组织包埋后待包埋框蜡液表面凝结成一层蜡膜时才移入冷水中使之迅速均匀凝结。如采用自动包埋机，组织包埋后即移至左侧的冷冻台上，石蜡冷凝后即可把组织蜡块脱出。 5.一个蜡块内如包埋几块同一例组织时,其组织性质宜相同，方向应一致,各组织之间的距离应紧贴。病理组织的包埋五、石蜡包埋的注意事项 6.包埋时必须先把熔化的包埋石蜡注入包理框内，然后用眼科小镊钳取浸蜡缸内包埋盒的组织置入包埋框内，并用镊子轻轻按平，不可在包埋框内先放入组织后注入熔蜡，也不可在钳取组织后慢慢观察停留过久才置入包埋框内,这可使组织表面蜡液凝结后与包埋石蜡难以熔合