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将肽段顺序进行叠联以确定完整的顺序;基本策略：
片段重叠法＋氨基酸顺序直测法
基本步骤：
(1) 分离纯化蛋白质，测定氨基酸
种类、数目、含量；
(2) 进行末端分析，确定多肽链数目，
(3) 拆分多肽链，断开多肽链内二硫键；
(4) 用两种以上方法裂解多肽链成较小的片段，分别分离纯化
(5) 测定各肽段的氨基酸顺序；
(6) 确定半胱氨酸残基间形成二硫键交联桥的位置；
(7) 片段重叠法重建完整多肽链一级结构。;;多肽N、C-末端氨基酸的测定 ;Edman化学降解法;3、转化反应;丹磺酰氯(dansyl chlorid) 末端分析（DNS法）;C-末端分析:肼解法;多肽链的部分裂解 ;溴化氰断裂法;消化道内几种蛋白酶的专一性
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