动物疫病检验技术 中和试验概述 中和试验概述.pptx

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;;;;;;;;;用于检出病料中的病毒,亦可进行初步鉴定或定型。 先根据病毒易感性选定试验动物及接种途径。将病料研磨,并稀释成一定浓度。 污染的病料需加抗生素,或用细菌滤器过滤,与已知的抗血清等量混合,并用正常血清加稀释病料作对照。混合后置37℃1h,分别接种实验动物,每组至少3只。分别隔离饲喂,观察发病和死亡情况。对照动物死亡,而中和组动物不死,即证实该病料中含有与该抗血清相应的病毒。 本法亦可用于毒素的鉴定和分型。 ;本法多将病毒作10倍递增稀释,分置2列试管,第一列加正常血清(对照组),第二列加待检血清(试验组)。 混合后,置37℃作用1h,将各管混合液分别接种选定的试验动物,每一稀释度用3-5只动物。 接种后,逐日观察,并记录其死亡数,观察结束后,计算LD50和中和指数,本法适用于大量样本的检测。 对病毒而言,通常中和指数大于50者判为阳性,10-49为可疑,小于10为阴性。  ;本法用以测定抗病毒血清的中和价. 将待检血清2倍递增稀释,加等量已知毒价的病毒液(与血清混合后,每一接种剂量含病毒100LD50),摇匀后,置37℃作用1h,接种实验动物后观察。;先将病毒稀释成适当浓度,使每0.2ml含80个-100个PFU(空斑形成单位),与不同稀释度的待检血清等量混合,置37℃作用1h-2h; 分别测定PFU,使空斑减少50%血清稀释度即为该血清的中和价。;

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