公共场所卫生监测微生物检验技术(2014版)全面.ppt

必威体育精装版. * 大肠埃希氏菌 定义：大肠埃希氏菌广泛存在于是人和温血动物的肠道中，能够在44.5℃发酵乳糖产酸产气、IMViC生化试验为+ + --或-+ -- 大肠埃希氏菌主要是用于指示水源近期受到粪便污染。?? 该指标与粪便污染的相关性好 必威体育精装版. * 检验方法 多管发酵法 总大肠菌群多管发酵法初发酵检测阳性管，用接种环挑一环到EC-MUG管中，44.5℃培养24h±2h，用366nm紫外灯照摄，产生兰色荧光者为阳性 必威体育精装版. * 酶底物法 大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）分解四甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷（4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide，MUG ）使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光的原理，来判断水样中是否含有大肠埃希氏菌。 定性试验、定量试验（10管法、51孔定量盘法） 培养基：EC-MUG 黄色有蓝色荧光者为阳性 水样不变黄有蓝色荧光者不属于阳性 必威体育精装版. * 必威体育精装版. * 必威体育精装版. * 公共场所卫生检验、检测与评价 公共场所空气细菌总数测定 (GB/T 18204.1-2000) 茶具、毛巾、床上卧具等公共用品的细菌总数和大肠菌群 必威体育精装版. * 公共场所空气细菌总数检验方法 （GB/T 18204.1-2000） 撞击法：将集菌的营养琼脂平板置36±1℃培养48h，计数菌落数。 自然沉降法：将已采样平板置36±1℃培养48h，计数每块平板上菌落数，求出全部采样点的平均菌落数。 必威体育精装版. * 公共场所空气细菌总数结果报告 撞击法 计算公式：细菌总数=平皿菌落数/（采样器流量*采样时间） 结果单位： cfu/m3 自然沉降法 计算公式：细菌总数=平均每皿菌落数 结果单位：cfu/皿 必威体育精装版. * 茶具细菌总数检验方法 （GB/T 18204.2-2000） 采样：用灭菌生理盐水湿润棉拭子，在茶具与口唇接触的内外缘涂抹50cm2，既1-1.5cm高处一圈。用灭菌剪刀剪去棉签手接触的部分，将棉拭子放入10mL生理盐水内，4h内送检。 此液作为1:10 必威体育精装版. * 茶具细菌总数检验方法 将采来的1:10样品涂抹液（棉拭子涂抹）充分混匀，再取1:10样液1mL于9mL的NS中充分混匀为1:100样液。两稀释度各吸样液于两个平皿中，每皿1mL。最后注入营养琼脂，置36±1℃培养48h计数菌落数。 同时做空白对照。 必威体育精装版. * 茶具细菌总数结果报告 计算公式： 细菌总数=平均菌落数*稀释倍数/50 单位：cfu/cm2 必威体育精装版. * 茶具大肠菌群检验方法 （GB/T 18204.3-2000） 必威体育精装版. * 茶具大肠菌群检验 发酵法：取测定茶具菌落总数剩余样品，倒入双料乳糖胆盐发酵溶液中，置37℃培养箱内培养24 h后进行观察。阴性报告。阳性进一步接种EMB、乳糖发酵管。 纸片法：用灭菌生理盐水湿润5 cm×5 cm大肠菌群快速检测纸片两张，分别粘贴在茶具内、外缘口唇接触处，约30 S后取下，置于无菌塑料袋内。置37℃培养箱内培养24 h后进行观察。结果报告 必威体育精装版. * 茶具大肠菌群发酵法检验步骤 推测性试验：将测定细菌总数剩余的检样倒入双料乳糖胆盐发酵液中，置36±1℃培养24h观察结果。 证实试验：自推测性试验阳性管中取一接种环培养液，接种EMB平板上，置36±1℃培养24h观察结果。挑取可疑菌落染色镜检，同时接种乳糖发酵管做复发酵试验，36±1℃培养24h观察结果。 必威体育精装版. * 茶具大肠菌群纸片法检验步骤 将已采样的大肠菌群测定纸片置36±1℃培养16～18h观察结果。 结果判定：若纸片保持紫蓝色不变为大肠菌群阴性，纸片变黄并在黄色背景上呈现红色斑点或片状红晕为阳性。 必威体育精装版. * 毛巾、床上卧具细菌总数检验方法 （GB/T 18204.4-2000） 涂抹法：25 c㎡(5 cm ×5 cm)面积范围;床单、被单在上下两部各25 c㎡面积范围内有顺序地来回涂抹，将棉拭子放人10 mL生理盐水内，4h内送检 戳印法 必威体育精装版. * 毛巾、床上卧具细菌总数涂抹法检验步骤 将采来的1:10样品涂抹液（棉拭子涂抹）充分混匀，再取1:10样液1mL于9mL的NS中充分混匀为1:100样液。两稀释度各吸样液于两个平皿中，每皿1mL。最后注入营养琼脂，置36℃培养48h计数菌落数。 同时做空白对照。 必威体育精装版. * 毛巾、床上卧具细菌总数结果报告 计算公式： 细菌总数=平均菌落数*稀释倍数/2 单位：cfu/25cm2 必威体育精装版. * 毛巾、床上卧具大肠菌群检验方法 （GB/T 18204.5-2000） 发酵法 纸片法 必威体育精装版. * 采样