技术审评报告42-人EGFRALKBRAFKRAS基因突变联合检测试剂盒（可逆末端终止测序法）（CSZ1700157）检.docx

受理号：CSZ1700157 体外诊断试剂产品注册技术审评报告 产品中文名称：人 EGFR/ALK/BRAF/KRAS 基因突变联合 检测试剂盒（可逆末端终止测序法） 产品管理类别：三类 6840 申请人名称：广州燃石医学检验所有限公司 国家食品药品监督管理总局医疗器械技术审评中心 PAGE PAGE 10 / 25 基本信息 3 一、申请人名称 3 二、申请人住所 3 三、生产地址 3 产品审评摘要 4 一、产品概述 4 二、临床前研究摘要 6 三、临床评价摘要 15 四、风险分析及说明书提示 22 综合评价意见 25 广州燃石医学检验所有限公司。 广州国际生物岛螺旋四路 7 号 3 栋第六层 601 房。 广州国际生物岛螺旋四路 7 号 3 栋第二层 202 房；广州 国际生物岛螺旋四路 7 号 3 栋第六层 601 房。 产品审评摘要 A1 阴性质控品(NC) 白色 4μL×1 管 4μL×1 管 试剂盒 1 A2 阳性质控品(PC) 红色 4μL×1 管 4μL×1 管 PC 突变类型: EGFR L858R；EGFR T790M；EGFR E746-A750 19del(COSM6225); KRAS G12V；BRAF V600E；EML4(E6)-ALK (E20) A3 DBM 阻断剂 1 蓝色 80μL×1 管 220μL×1 管 A4 Hyb 缓冲液 透明 100μL×1 管 250μL×1 管 A5 RBM 阻断剂 2 橘黄色 8μL×1 管 20μL×1 管 A6 探针 LC001 红色 15μL×1 管 40μL×1 管 试剂盒 2 A7 链霉亲和素磁珠 白色 800μL×1 瓶 2mL×1 瓶 试剂盒 3 A8 结合缓冲液 白色 11.5mL×1 瓶 31mL×1 瓶 试剂盒 4 A9 WB 清洗液 1 白色 4mL×1 瓶 9mL×1 瓶 A10 WB 清洗液 2 白色 13mL×1 瓶 33mL×1 瓶 试剂盒具体组成成分及配套试剂及软件见说明书。 本试剂盒用于定性检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者经福尔马林固定的石蜡包埋（FFPE）的组织标本中 EGFR /ALK /BRAF /KRAS 基因变异。其中，EGFR 基因中：19 号外显子缺失 （19del）、L858R 点突变用于吉非替尼片、盐酸埃克替尼片伴随诊断检测，T790M 点突变用于甲磺酸奥希替尼片的伴随诊断检测；ALK 基因中：ALK 重排（融合）用于克唑替尼胶囊 的伴随诊断检测（具体可参照表 2）。 吉非替尼片、 盐酸埃克替尼片 EGFR：19del、L858R 甲磺酸奥希替尼片 EGFR：T790M 克唑替尼胶囊 ALK 重排（融合） 表 3 中为本试剂盒可以检出，但未经伴随诊断验证的基因突变类型。 EGFR S768I BRAF V600E KRAS G12V、G12S、G12C、G12R、G12D、 G12A、G13D 其检测结果仅供临床参考，不应作为患者个体化治疗的唯一依据。临床医生应结合患者病情及其他实验室检测指标等因素对检测结果进行综合判断。 12 人份/盒；36 人份/盒。 该试剂盒采用 RNA 探针捕获技术，首先对从 FFPE 样本中提取的组织 DNA 进行片段化、加接头、及 PCR 富集等步骤制备预文库；其后采用具有特定序列的 RNA 探针与预文库进行杂交，从而特异性地捕获来自人类基因组 4 种基因中的部分外显子与内含子区域；之后通过磁珠法富集被探针捕获的 DNA 片段，并对捕获的文库进行定量与质控；最后将经定量的文库采用基因测序仪（型号：MiSeqDx，Illumina 公司生产） 进行高通量测序。采用生物信息学软件判读 4 种靶基因中是否存在来自肿瘤的变异。 主要原材料的选择 该试剂盒主要原材料包括：探针、链霉亲和素磁珠，阴性质控品（NC）、阳性质控品(PC)，这些原材料均为外购方式获得，探针为申请人自行设计后由专业的合成公司合成。申请人选择有资质的供应商提供的原料，通过功能性试验， 筛选出最佳原材料和供应商。制定了各主要原材料质量标准并经检验合格。 企业参考品和质控品设置情况 企业参考品包括阴性参考品、阳性参考品、重复性参考品和最低检出限参考品。阴性参考品包括 EGFR /ALK /BRAF /KRAS 基因变异阴性的正常组织样本、试剂检测范围内 EGFR /ALK /BRAF /KRAS 基因变异阴性且其它基因变异阳性（PTEN 、PIK3CA 、TP53 基因变异阳性）的肺癌组织样本和细胞系样本， 阳性参考品、重复性参考品和最低检出限参考品采用临床EGFR /ALK /BRAF /KRAS 基因变异阳性的肺癌组织样本和细胞系样本。 阴性参考品共 13 份，包括 7 份 EGFR /A