GB/T 28976-2012草莓潜隐环斑病毒检疫鉴定方法.pdf

ICS 65.020.01 B 16 道昌 中华人民共和国国家标准 GB/T 28976-2012 草莓潜隐环斑病毒检疫鉴定方法 Detection and identification of strawberry latent ringspot virus 2012-12-31 发布 2013-06-01 实施 中华人民共和国国家质量监督检验检菇总局也舍 中国国家标准化管理委员会 a 叩 GB/T 28976- 2012 目。吾 本标准按照GB/T 1. 1-2009 给出的规则起草。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC 271） 提出并归口． 本标准起草单位z 中华人民共和国上海出入境检验捡疫局、中华人民共和国宁波出入境检验检疫 局、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局． 本标准主要起草人z 杨翠云、于翠、闰伟刚、郑建中、印丽萍、李彬． - I GB/T 28976-2012 草莓潜隐环斑病毒检疫鉴定方法 1 范围 本标准规定了草莓潜隐环斑病毒的检疫鉴定方法。 － 本标准适用于植物材料，包括元性繁殖材料、种子和苗木中草莓潜隐环斑病毒的检疫鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注目期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件．凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单〉适用于本文件。 SN/T 1840 植物病毒免疫电镜检测方法 SNIT 2122 进出境植物及植物产品检疫抽样 3 草莓潜隐环斑病毒基本信息 中文名z 草莓潜隐环斑病毒 学名：strawberry latent ringspot virus 缩写：SLRSV 分类地位：Secoviridae 科，温州蜜柑矮缩病毒属（Sadwavirus) 草莓潜隐环斑病毒的其他信息参见附录A。 4 方法原理 病毒粒子的形态特征、为害症状、血清学特性和分子生物学特征是检疫鉴定该病毒的主要依据，采 用 DAS-ELISA、J{下PCR、实时荧光RT-PCR、免疫电镜和鉴别寄主反应等方法进行检疫鉴定。 5 仪器设备、设施、用具和试剂 5. 1 仪器设备 酶标仪、PCR仪、实时荧光PCR 仪、超净工作台、电子天平（感量0. 001 g）、电掠仪、电掠槽、提胶成 像系统、电子透射显微镜、水浴锅、高速玲冻离心机、超低温冰箱（－80 ℃〉、高压灭菌锅、制冰机、微波 炉、涡旋振荡器。 5.2 设施 植物隔离检疫圃， 5.3 用具 可调式微量移液器（2 µL、10 µL、100 µL、200 µL、1 000 µL）及相应的元 RNase 吸头、无 RNase 离 心管、PCR 管、研钵、样品袋、标签、锤子、放大镜等． 5.4 试剂 5. 4. 1 除有特殊说明外，所有实验用试剂均为分析纯或生化试剂． GB/T 28976-2012 5. 4. 2 SLRSV 抗体、Trizol、焦碳酸二乙醋（DEPC）、被氨、三氯甲饶、养戊醇、异丙厚、乙醇‘萨琉基乙 醇、AMV反转录酶、Taq DNA 聚合酶、DNA 相对分子质量标记、漠化乙键、琼脂塘、澳酣蓝等．血清学 和分子