HLA基因分型和抗HLA抗体检测.pdf

HLA基因分型和抗HLA抗体检测 HLA基因分型和抗HLA抗体检测 在异基因造血干细胞移植中的临床意义 在异基因造血干细胞移植中的临床意义 • HLA基因的分子结构及特征 • HLA基因分型在allo-HSCT中的临床应用 • 抗HLA抗体检测的临床意义 • 美国ASHI认证实验室的价值 PartⅠ HLA基因的分子结构及特征 HLA (人类白细胞抗原)基因的结构 HLA位于人类6号染色体,存在于人体的各种有核细胞表面 HLA的命名与分辨率的相关性 基因 特异蛋白 蛋白相同,编码区无义突变 非编码区,内含子 HLA-A*02:101:01:02N 不表达蛋白 血清型 低分辨 02:XX SSP或SSOP 中分辨 02:ZA HD-SSOP 基因型 高分辨 02:01G SBT 等位基因 02:01 SBT+GSSP 分辨 实验方法学 HLA基因分型实验方法的发展 • 血清学方法 • 特异性引物PCR扩增法(SSP) • 正或反向寡核苷酸探针杂交法(SSOP)-Luminex技术 • 核苷酸序列分析法(SBT)-一代基因测序技术 • 单分子核苷酸序列分析法(NGS)-二代基因测序技术 HLA基因分型分辨率在HSCT中的应用 • HLA低分辨基因分型:脐血库入库供者,器官移植 • HLA中分辨基因分型:家系单倍型完整的亲缘HLA全 相合移植,脐血移植(根据Code码和常见等位基因频率 组合排除),器官移植 • HLA高分辨基因分型:无关供者入库,亲缘移植(包括家 系单倍型不完整的HLA全相合和单倍体),脐血移植 • HLA等位基因分型:非血缘移植,包括HLA全相合和部 分等位基因错配无关供者移植 PartⅡ HLA基因分型在allo-HSCT中的临床应用 无关HLA全相合与亲缘1个抗原错配HSCT的预后比较 • 日本学者对AML,CML和MDS标危患者进行HLA-1个抗原 错配亲缘供者与HLA-8/8相合无关供者比较研究提示,移植 后总死亡率升高; HLA-B抗原错配移植后TRM升高,OS下降 ;C抗原错配或多个等位基因错配在B抗原错配中出现频 高且与移植预后差相关. • 美国研究表明:无关供者全相合的移植效果明显好于1个等 位基因或1个抗原错配的亲缘错配供者. • 结论:优先选择无关全相合供者进行HSCT HLA基因分型在选择无关供者错配HSCT中的建议 • NMDP数据显示:HLA-A,B,C,DR位点全相合和1个位点错配 GvHD发生 28%VS 37%;1年OS 52%VS 43%. B,C位点错配 的耐受好于A, DR位点. (BM-URD) • NMDP推荐选择策略HLA-A,B,C等位基因错配好于抗原错配 ,最不利因素是C抗原错配; A,DQ等位基因和抗原与DR抗原 错配均不影响移植后复发和cGvHD;DP选择可允许等位基因 错配;推荐选择免疫原性低和可允许的错配位点.(PSC-URD) • 如果供受者A,B,C,DR位点不全相合,应该增加检测DQ, DP和 DR3/4/5位点的基因分型,以便选择最合适的供者进行移植. HLA基因分型在无关脐血供者选择中的作用 7 • NMDP基本原则:有核细胞数量(2.5×10 /kg和HLA≥4/6 匹