《普鲁卡因半数致死量_LD50的测定》.ppt

普鲁卡因半数致死量_LD50的测定 毒性试验 特殊毒性试验（致畸、致癌、致突变） 长期（慢性）毒性试验 急性毒性试验：1～7d 半数致死量（lethal dose 50%, LD50）：是指能够引起试验动物一半死亡的药物剂量，通常用药物致死剂量的对数值表示。 测定LD50意义 (1)是衡量药物毒性大小的指标，评价药物优劣的重要参数 (2)评价药物安全性---治疗指数 TI=LD50/ED50 (3)申报新药过程中必须提供的药理学资料 根据物质的半致死剂量LD50值，美国科学院把毒性物质危险划分为五个等级 ①“0”：无毒性，LD5015 g/kg； ②“1”：实际无毒性，5 g/kgLD5015 g/kg； ③“2”：轻度毒性，0.5 g/kgLD505 g/kg； ④“3”：中度毒性，50 mg/kgLD50500 mg/kg； ⑤“4”：高度毒性，LD5050 mg/kg 普鲁卡因产生毒性作用的原理: 普鲁卡因是一种局部麻醉药，当被大量吸收后会产生全身性毒性反应，主要表现为中枢神经系统先兴奋后抑制，初期表现为眩晕、烦躁不安、肌肉震颤，进而发展为神经错乱、惊厥、昏迷、呼吸抑制等。 患者可因呼吸衰竭而死亡。 LD50的测定方法有很多。如：目测机率单位法、加权机率单位法(Bliss法)、寇氏法、序贯法等。 Bliss法是目前推荐使用的方法。此法对剂量分组无严格要求，不需要剂量组有0%和100%死亡率，是目前公认最准确的测定方法。但本法计算繁琐，故现多采用计算机程序计算。 改良寇试法简便而计算较为精确。 【实验目的】 1.掌握药物的半数致死量测定的意义、方法、计算过程。 2.了解药物给药后动物所产生的毒性反应及其严重程度。 实验部分 实验动物：小白鼠50只，体重18～２２g，♀♂各半。 实验器材：计算机、电子秤、注射器、小鼠笼。 实验药品：1%普鲁卡因，苦味酸溶液（标记） 【实验材料】 1.体重相近（20±2g）。 2.健康，雌雄各半。 3.怀孕雌鼠剔除不用。 实验小鼠选择 随机原则：是指在抽样时排除主观上有意识地抽取调查单位，每个受试单位以概率均等的原则，随机地分配到实验组与对照组。 随机原则 【随机】 1.将小鼠雌雄分开，分别称重，一重量段放入一笼。（18.19.20.21.22） 2.标记小鼠：同一笼小鼠标记同一符号。 3.雌雄按重量顺序随机分为5组，保证不同性别体重小鼠均匀分配于各组。 小鼠随机分组处理 分组方式： 组号 1* 2* 3* 4* 5* 鼠号 1 2 3 4 5 5 1 2 3 4 4 5 1 2 3 3 4 5 1 2 2 3 4 5 1 ……  1. 按剂间比1：0.85，腹腔注射1%普鲁卡因，5组剂量分别为130mg/kg,153mg/kg,180mg/kg,212mg/kg和249mg/kg。 2.观察30min统计小鼠死亡数。 3. 用改良寇试法和bliss法计算普鲁卡因的LD50和95%可信限。 【实验步骤】 抓好后将小鼠保持头低位 改良寇试法 Bliss法 计算LD50及其95%可信限 基本要求 1.反映情况符合或接近对数正态分析。 2.相邻两计量比值相等。 3.各组动物数相等或相近。 4.不要求死亡率包括0%和100%，但二者和最好再80%~120%范围内。 改良寇试法 计算LD50 1. 最小剂量组死亡率0%，最大剂量组死亡率100%： LD50=lg-1（Xm-i（Σp-0.5）） p ——各组动物死亡率 Xm——最大剂量的对数 i ------相邻两组对数剂量差值 改良寇试法 2. 0%最小剂量组死亡率30%，或70%最大剂量组死亡率100%时： LD50=lg-1[Xm-i(Σp-(3-Pm-Pn)/4)] Pm------剂量最大组死亡率 Pn-------剂量最小组死亡率 改良寇试法 3.标准物 SlgLD50=