动物源性食品中兽药残留的快速筛查及定量检测技术研究.pdf

摘 要 随着我国经济高速稳定的增长，养殖业得到了迅猛发展，动物源性食品层出不 穷。兽药作为养殖业的常用药，在防治疾病、提高生产和维护公共卫生安全等方面 都发挥着重要的作用。与此同时，由兽药残留带来的食品安全问题也越来越受到社 会各界的重视。兽药残留限量是评价动物源性食品是否安全的准绳，在国际合作与 竞争中也是重要的一环，因此，对食品中兽药残留的高效准确筛查以及定量检测技 术研究显得越来越重要。 本选题围绕动物源性食品兽药残留分析，重点进行了以下研究： （1）通过在线固相萃取-高效液相色谱- 串联质谱的方式，建立肉类产品（主要是 猪肉和羊肉）中 β-受体激动剂的全自动分析方法。取样品在 37 ℃的温度下酶解 16 h， 用 MCX 在线固相萃取小柱净化，然后用 XBridge C18 色谱柱进行分离，再选用流动 相（0.1% 甲酸水溶液-乙腈）梯度洗脱，选用电喷雾电离正离子模式，采用多反应监 测模式进行检测，用内标法进行定量。测定结果显示 β-受体激动剂在 0.01～10.00 ng/mL 的范围内具有良好的线性关系，相关系数均大于 0.9990 ；方法的检出限 0.004～ 0.040μg/kg，方法的定量限 0.02～0.20 μg/kg ；方法回收率76.5%～107.7%，相对标准 偏差小于 10%。此方法可应用于肉类中 β-受体激动剂的定性及定量分析，具有速度 快、灵敏度高的特点。 （2 ）通过实验建立基于超高效液相色谱- 四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱对牛 奶中 19 种喹诺酮类抗生素进行筛查和确证的方法。取牛奶样品，用酸化乙腈提取蛋 白，沉淀，用PRiME HLB 固相萃取柱净化，用Waters Acquity BEH C18 柱（2.1 mm×100 mm ，2.5 μm ）进行分离，经乙腈和0.1% 甲酸水溶液梯度洗脱，在全扫描（full MS ） -数据依赖扫描（ddMS2 ）模式下检测结果。实验结果表明：19 种喹诺酮类抗生素的 精确质量相对偏差小于 3.0×10-6，在 0.2～200 ng/mL 区间内显示良好的线性关系。 此外，方法的相关系数都在 0.998 以上；方法的检出限范围为0.1～0.5μg/kg，方法的 定量限范围为 0.2～1.0 μg/kg ；加标水平在0.2 μg/kg-10.0 μg/kg 时，该方法的回收率 为 62.1%～100.4%，相对标准偏差在 10%以下。该方法具有简便、快速、准确的优 点，可用于牛奶中 19 种喹诺酮类抗生素的快速筛查和定量分析。 (3)建立了基于超高效液相色谱- 四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱筛查和确证猪 肉中 9 种大环内酯类抗生素的方法。猪肉样品经乙腈提取，正己烷除脂，用 Waters Acquity BEH C18 柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm ）分离，以甲醇和0.1% 甲酸水溶液进 行梯度洗脱，在全扫描（full MS ）-数据依赖扫描（ddMS2 ）模式下进行检测。结果 表明：9 种大环内酯类抗生素的精确质量相对偏差小于 1.0×10-6，在 0.5～100 ng/mL 范围内线性关系良好，相关系数均大于 0.998 ；检出限范围为0.05～0.2 μg/kg，定量 I 限范围为 0.1～0.4 μg/kg ；加标水平水平为 0.1 μg/kg-4.0 μg/kg 时，方法回收率为 69.4%～107.6%，相对标准偏差低于 10%。该方法简便、快速、准确，适用于猪肉中 9 种大环内酯类抗生素的快速筛查和定量分析。 关键词：高效液相色谱- 串联质谱法；在线固相萃取；β-受体激动剂；喹诺酮类抗生 素；大环内酯类抗生素 II Abstract With the rapid and steady growth of Chinas economy, the breeding industry is booming and animal-derived food emerges one after another. Therefore, as com