细胞 培养的注意事项.doc

相关疾病: 每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真就是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,瞧在眼里怕丢了　,培养细胞时有哪些惨痛经验教训可以分享呢？??早走早脱身,从此专注黑生物??1。 严格无菌操作,多喷喷酒精,要就是对灭菌得东西不放心,自己包自己送自己烘干、?? 　２. 不要与别人共用试剂耗材,自己准备一套。?　 3. 有可能得话在拿到新细胞得时候做好支原体衣原体检测。?? 4. 水浴锅很脏,生化培养箱要就是得手动加湿得话盘里得水也会很脏,勤换 (灭菌水加进去)、??　　５. 晚上离开得时候最好给细胞房照紫外,超净台就是用完就开。??　　6、　最好得就是同一时间就您一个人在用细胞房在养细胞。? 非科班出身经验分享? １。 别怕浪费。枪头什么得只要有可能污染就换,如果用酒精灯就什么都稍微烤一下,别直接放到火上,离一段距离。 　2。 动作要既轻柔又有力、动作太重会有一堆一堆得气泡,动作太轻就吹不下来、、、 刚开始得时候吹细胞太痛苦了,稍微一下就起泡。后来就就是吹得时候枪里得培养基不要一次全都压出来,留一点,枪得最头部尽量深得在液面以下。??　 3、 离开过操作台得东西再进操作台之前一定要用酒精喷一遍,包括一切实验耗材、仪器、以及您带着手套得手、　 ４、 实验结束后对实验台得消毒。紫外什么得,用前用后都照个 3０ 分钟。? 　5. 身体得各个部分尽量得少接触不需要接触得地方得地方。比如实验台,又比如培养箱内部。?? 6、 细胞得密度根据细胞得性质、传代得时间以及自己得心情来定。培养基得话最多最多不要超过 2 天就要换一次。细胞可以不传代,但就是培养基就是一定要换得。??　 大概就就是,不该碰得地方不碰,有影响得地方少碰; 该使劲得时候绝对不含糊,不该使劲得地方一定忍住、如果就是比较简陋得操作台就一定要摆个酒精灯,所有操作紧密围绕在酒精灯周围进行。如果就是高级台子就多用酒精喷喷、感觉生物得实验,心疼钱就还就是不要做了、? 最后一点点绝对非科班得经验、癌细胞真就是坚挺。有一次实在就是不想传了,放了　5 天吧,感觉都长了几层出来,培养基都黄了。抱着试一试得心情传了一次,又坚强得活过来了。当然,状态肯定也差得很了。 换种心情,好好生活!　 养了三年细胞,各种肿瘤细胞,说一点自己得瞧法:?? 　1。 培养细胞前,可以瞧瞧细胞特点说明书,包括细胞正常生长得状态图、传代、培养基得类型等。　　2。　不同细胞生长周期不同,有得生长很快,比如说 MDA—MＢ－2３1,传代得时候取离心悬液得十分之一就已经足够了,有得又就是特别慢,等得人心焦,BＴ474 就就是,传代就是一分二,复苏起始得时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞得过程中多多摸索了、? ３、 对于娇弱得细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速与时间,每天都要去瞧一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。??　　４、　冻存细胞复苏后第二天最好更换一次培养基、?　 ５。　培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次。? 　6。 养细胞最大得教训:不能偷懒!?? 细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。??　　1、 不管买得细胞、惠赠得细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测就是否有支原体污染;　迅速扩增冻存、? 　２。　发现有污染迅速处理掉,特别就是当您养了很多种细胞时;　细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染得话,细胞会长得慢,买个支原体检测得 kit 定期检测一下、?　　３、 细胞房日常得值日清洁就是必须得,此外还要定期熏蒸。?　 4、　细胞得传代一定要规律,保持相同得 cｏnｆlｕeｎｃy　与传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延、 5。 注意个人卫生、 靠内心感动细胞　 1. 自己得细胞自己养,血得教训。?　 ２。 在生物安全柜 (或者超净台),枪头,血清管,血清,培养基,瓶子都足够好,并且细胞房有良好得卫生措施 (比如隔离服,手套,口罩,清洁,HEＰA 等等)　且不违法操作原则得情况下,您其实很难污染。 3。 上述条件不完备得情况下,就要多注意无菌操作了:比如要用得东西提前拿到台子里照啊 (不过这个其实也不大好,因为会挡住紫外线),使用前 SDS+酒精擦台子,进出超净台一定要酒精擦手、? 4。　少对细胞说话,多靠内心来感动它们 (就是得！ 心不诚就是不可以得!) 至少 １ 天瞧　1 次。??　养细胞很容易?? 养细胞真得不难,最关键几点:??　　1。 所有得东西使用最好得,如果您用得血清、培养皿、培养基、胰酶什么得都就是进口得,真得很难相信您会把细胞养坏。?　 2. 动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中得时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓得细胞状态差,很多时候就是传