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胰酪大豆胨琼脂培养基适用性验证方案 题目：胰酪大豆胨琼脂培养基适用性检查方案 第 1 页 共 3 页 编号： YB-STP-09-006 起草： 日期： 年 月 日 审核： 日期： 年 月 日 批准： 日期： 年 月 日 版本：1 颁发部门：质量部 执行日期： 年 月 日 分发部门：质量部、化验室 标准依据：《中国药典》2015年版四部 目的：验证胰酪大豆胨琼脂培养基适合需氧菌计数的测定；验证同一厂家，不同批号，对培养基适用性无明显差异。 范围：胰酪大豆胨琼脂培养基。 内容： 1. 概述 培养基质量是影响微生物检验结果的重要环节。计数测定用培养基的促生长能力是微生物限度检查结果判断的重要影响因素，对菌落颜色、形态等指标存在较大差异，从而影响结果判断的客观性。 培养基适用性检查是通过检验用培养基与对照培养基的比较，以阳性菌的生长状态或特征来评价判断检验用培养基是否符合检验要求。 2. 验证原因 按2015版《中国药典》微生物限度检验要求。 3. 验证过程 3.1 验证人员： 组长： 组员： 3.2 验证时间 年 月 日 至 年 月 日 题目： 胰酪大豆胨琼脂培养基适用性检查方案 第 2 页 共 3 页 编号： YB-STP-09-006 版本：1 3.3 验证用仪器 仪器名称 型号 生产厂家 生化培养箱 SPX-250B-Z 上海博讯实业有限公司 洁净工作台 JB-CJ-1FX 苏州佳宝净化工程设备有限公司 立式压力蒸汽灭菌器 BXM-30R 上海博讯实业有限公司医疗设备厂 3.4 验证用培养基及试剂 培养基名称 批号 生产厂家 胰酪大豆胨液体培养基 上海盛思生化科技有限公司 胰酪大豆胨琼脂培养基 上海盛思生化科技有限公司 胰酪大豆胨琼脂对照培养基 中国食品药品检定研究院 0.9%无菌氯化钠溶液 3.5 验证用菌种 菌种名字 来 源 编 号 金黄色葡萄球菌 北京三药科技开发公司 [CMCC（B）26 003] 铜绿假单胞菌 北京三药科技开发公司 [CMCC（B）10 104] 枯草芽孢杆菌 北京三药科技开发公司 [CMCC（B）63 501] 3.6 菌液制备 接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至10ml胰酪大豆胨液体培养基中，在32℃培养24小时，然后用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释至每1ml含菌数小于100cfu的菌悬液。 3.7 适用性检查 3.7.1 取上述金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌菌液各2ml，分别注入6个无菌平皿内（每皿1ml菌液），加入菌液后立即倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，同时制备1个胰酪大豆胨琼脂培养基平皿加入0.9%无菌氯化钠溶液，做无菌性检查，混匀，凝固，置32℃下倒置培养72小时，计数； 3.7.2. 取上述金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌菌液各2ml，分别注入6个无菌平皿内（每皿1ml菌液），加入菌液后立即倾注胰酪大豆胨琼脂对照培养基，同时制备1个胰酪大豆胨琼脂培养基平皿加入0.9%无菌氯化钠溶液，做无菌性检查，混匀，凝固，置32℃下培养72小时，计数。 题目： R2A琼脂培养基适用性检查方案 第 3 页 共 3 页 编号： YB-STP-09-006 版本：1 3.8 检查结果 胰酪大豆胨琼脂培养基的适用性检查结果如下 菌种 类型 培养基 平皿号 培养基上的菌落计数（cfu/ml） 结果 胰酪大豆胨琼脂 培养基 胰酪大豆胨琼脂 对照培养基 胰酪大豆胨琼脂培养基上的菌落数/胰酪大豆胨琼脂对照培养基上的菌落数 金黄色葡萄球菌 1 2 铜绿假 单胞菌 3 4 枯草芽 胞杆菌 5 6 空白 对照 7 8 4. 结果判定 根据上面的数据，可以看出胰酪大豆胨琼脂培养基平皿上的菌落数与胰酪大豆胨琼脂对照培养基平皿上的菌落数的比值为 （应在0.5-2范围内），而且菌落形态大少与对照培养基平皿上的菌落 ，判定R2A琼脂培养基的适用性检查 。 检查人： 复核人：