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动物蠕虫学粪便检查技术简介 作者: 日期： 动物蠕虫学粪便检查技术（一） 一、 实验目的及要求 ?掌握动物蠕虫学常见的实验室粪便虫卵检查技术。 .在光学显微镜下区分虫卵和异物。 ?认识吸虫卵、绦虫卵、线虫卵等蠕虫虫卵，掌握其一般特征。 二、 实验器材 载玻片，盖玻片，镊子，平皿，烧杯，塑料杯或纸杯，漏斗，漏斗架，胶帽吸管，离心管，试 管，玻璃棒，粪筛，纱布，平底管（青霉素小瓶），玻璃珠，三角小烧瓶， 100ml球状烧瓶，火柴 棍，特制铁丝圈，虫卵计数板，普通离心机，光学显微镜等。 甘油，饱和食盐水，0.1N （或4% ） NaOH，家畜新鲜粪便等。 三、 实验方法、步骤和操作要领（直接涂片法、漂浮法、沉淀法、虫卵计数法） （一）直接涂片法（ Exam in ati on of Direct Smears ） 在清洁的载玻片上滴 1-2滴水或1滴甘油与水的等量混合液（加甘油的好处是能使标本清晰，并 防止过快蒸发变干），其上加少量粪便，用火柴棍仔细混匀。再用镊子去掉大的草棍和渣子等，之后 加盖玻片，置光学显微镜下观察虫卵或幼虫。 （图1-1） 图1-1 直接涂片法示意图 另一方法是直接涂片法的改良法叫回旋法。取 2?3g粪样加清水2?3倍，充分混匀成悬液。后 用玻璃棒搅拌0.5 — 1min，使之成回旋运动，在搅拌过程中迅速提起玻璃棒，将棒端附着的液体放于 载片上涂开，加上盖片在镜下检查。检查时多取几滴悬液。该方法的原理是由于回旋搅动的结果，可 使玻璃棒端悬液小滴中附有较多量的寄生虫卵或幼虫。 （二）漂浮法（Method In volvi ng Flotatio n ） 其原理是采用比重高于虫卵的漂浮液，使粪便中的虫卵与粪便渣子分开而浮于液体表面，然后进 行检查。漂浮液通常多采用饱和盐水，其方法简便、经济、易行。饱和盐水漂浮法对大多数线虫卵、 绦虫卵及某些原虫卵囊均有效，但对吸虫卵、后圆线虫卵和棘头虫卵效果较差。 饱和盐水漂浮方法操作步骤：取新鲜粪便 2g放在平皿或烧杯中，用镊子或玻璃棒压碎，加入 10 倍量的饱和盐水，搅拌混合，用粪筛或纱布过滤到平底管中，使管内粪汁平于管口并稍隆起为好，但 不要溢出。静置 30分钟左右，用盖片蘸取后，放于载片上，镜下观察；或用载片蘸取液面后翻转， 加盖片后镜检；也可用特制的铁丝圈进行蘸取检查。 （图1-2） 图1-2 漂浮法示意图 除上述漂浮方法外，还有一种简单的漂浮技术.它可以检查含卵量少的粪便（每 g粪便少于50 个虫卵）。具体步骤如下：即取 3g粪便放于一塑料杯或烧杯内，加进 50ml漂浮液后?用玻璃棒搅 匀，通过粪筛或双层纱布过滤到另一个杯中?漂浮 10分钟?然后用一试管插在滤液的中央底部，并 迅速提起。把附在上面的液滴滴落在载片上，加上盖片镜检。 （三） 沉淀法（ Sedime ntati on Tech nique ） 其原理是利用虫卵比重比水大的特点，让虫卵在重力的作用下，自然沉于容器底部，然后进行检 查。沉淀法可分为离心沉淀法和自然沉淀法两种。 ?离心沉淀法。通常采用普通离心机进行离心，使虫卵加速集中沉淀在离心管底，然后镜检沉 淀物。方法是取5g被检粪便，置于平皿或烧杯中，加 5倍量的清水，搅拌均匀。经粪筛和漏斗过滤 到离心管中。置离心机上离心 2-3分钟（电动离心机转速约为 500转/分），然后倾去管内上层液 体，再加清水搅匀，再离心。这样反复进行 2-3次，直至上清液清亮为止，最后倾去大部分上清液， 留约为沉淀物1/2的溶液量，用胶帽吸管吹吸均匀后，吸取适量粪汁（ 2滴左右）置载玻片上，加盖 玻片镜检。 ?自然沉淀法。操作方法与离心沉淀法类似，只不过是将离心沉淀改为自然沉淀过程。沉淀容 器可用大的试管进行。每次沉淀时间约为半小时左右。自然沉淀法缺点是所需时间较长，但其优点是 不需要离心机，因而在基层乡下操作较为方便。 （四） 虫卵计数法（Egg Cou nting Method ） 虫卵计数法主要用于了解畜禽感染寄生虫的强度及判断驱虫的效果。方法有多种，这里介绍二种 常用的计数方法。 .麦克马斯特氏法（ McMasters Method ）。 计数板的构造：计数板是由二片载玻片组成，其中一片较另一片窄一些（便于加液）。在较窄的 玻片上有1cm见方的刻度区二个，每个正方形刻度区中又平分为 5个长方格。另有厚度为 1.5mm 的几个玻璃条垫于二个载玻片之间，以树脂胶粘合。这样就形成了二个计数室，每个计数室的容积为 0.15ml （ 0.15cm 3 ）。（图 1-3） 计数方法：取2g粪便混匀，放入装有玻璃珠的小瓶内，加入饱和盐水 58ml充分振荡混合，通 过细的粪筛过滤，后将滤液边摇晃边用吸管吸出少量滴入计数室内，置于显微镜台上，静置几分钟 后，用低倍镜将二个计数室内见到