凤丹根际耐铜细菌的生物学功能与特性的初步研究.pdf

凤丹根际耐铜细菌生物学功能与特性的初步研 究 摘要 本实验以道地产区1—5年生凤丹根际细菌为研究对象，采用传统的微生物 学和分子生物学相结合的研究方法，并按照常规分类学和16SrDNA对从凤丹根 际分离、筛选的5株耐铜细菌进行鉴定，同时对目的菌株的生物学功能及生物学 特性进行初步的研究，具体研究结果如下： 1、从安徽南陵丫山(N)和铜陵凤凰山(T)1—5年生凤丹根际土壤中共分离纯 化得到236株细菌菌株，筛选出具有不同耐铜能力的菌株15株，其中有5株耐 A10‘5 B10。31、N4C10‘3 铜能力在200 3、N4 1的耐 mg／L以上，尤其是菌株N4 铜能力达到250 mg／L。 2、耐铜能力较强的菌株均从4年生凤丹根际土分离获得，且从N分离的菌株耐 铜能力高于T。依据常规分类学并结合16SrDNA分子鉴定方法对这5株菌株进 行的分析表明，5种菌隶属芽孢杆属和克吕沃尔氏菌属，其中芽孢杆属4株：N4 A B10。31(Bacillusclausii)、N4C10‘31(Bacillus 10～2(Bacillusflexus)、N4 C10‘32(Bacillus 104 subtilis)；克吕沃氏菌属1株：T4A jglexus)、N4 3(Kluyvera ascorbata)。 10。5 A 2、N4B10‘3 C10。31、N4C10‘32、T4A10-4 3、为进一步明确菌株N4 1、N4 3的功能多样性，对5株凤丹根际耐铜细菌进行了拮抗、产植I从、固氮、溶磷 和分解纤维素等生物学功能的测定。研究结果表明：5株耐铜细菌均具有抑制病 A10-5 B10-3 C10‘3 C10-3 A1o．43 原菌的能力；菌株N4 2、N4 l、N4 1、N4 2、T4 C10。3 C10‘3 10～2、N4 l、N4 均可分泌植物生长素；菌株N4A 2经过三代连续 培养后，均能在阿须贝培养基内明显生长，此生长现象表明该3菌株有固氮能力； B10—3 C10。3 C10。3 菌株N4 1、N4 1、N4 2在Pko平板培养基上形成溶磷圈，说明 10。5 C10。3 具有溶磷能力；纤维素筛选培养基上菌株N4A 2、N4 2有透明圈形成， C 具有分解纤维素能力。特别值得指出的是，菌株N410。32除具备耐铜能力之外 还同时具备拮抗、产IAA、固氮、溶磷和分解纤维素等5种生物学功能。 4、在不同的培养时间、pH、NaCI浓度、温度等条件下，对5株耐铜能力较强风 丹根际细菌进行了生理特性研究。研究表明：5株菌最适pH均为7．2；菌株N4A 10‘3 C 10’52、N4B 1、N4C1013l、N410—32、T4A1043分别在培养30h、60h、 60 h、50h和50h时生长量达到最大值；在l％．3％NaCl浓度下供试菌株均能 较好的生长，但随着NaCl浓度升高菌株的生长状况呈下降趋势，表明供试菌株