D-A020603-S-022 Roche Cobas z 480荧光定量基因扩增仪作业指导书.doc

Roche Cobas? Z 480荧光定量基因扩增仪作业指导书文件编号：D- Roche Cobas? Z 480荧光定量基因 扩增仪作业指导书 文件编号：D-A020603-S-022 版 本 号：2018-03-F，共 NUMPAGES 13 页 浙医二院检验科 分子检验SOP 2018年03月01日发布 PAGE 13/ NUMPAGES 13 2018年04月01日实施 年 度 回 顾 Annual Review 日期 回顾者签字 日期 回顾者签字 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 修 订 页 Revised 日期 修订 类型 修订内容 修订者 审核者 阅读人员签字 □修改 □新增 □删除 　 □修改 □新增 □删除 　 　 　 □修改 □新增 □删除 　 　 　 □修改 □新增 □删除 　 　 　 □修改 □新增 □删除 　 　 　 □修改 □新增 □删除 　 　 目的 保证Roche Cobas? Z 480荧光定量基因扩增仪的正确和正常使用。 适用仪器 Roche Cobas? Z 480荧光定量基因扩增仪。 SOP使用和变动 该作业指导书适用于本专业人员，使用前应认真阅读，在专业组组长指导下执行。若仪器设备和测定方法或试剂性能改变，应及时修订该SOP文件，可由任一使用该SOP的工作人员提出改动，并报专业组组长审核，经技术负责人批准，签字生效。 仪器使用操作 开机 打开Cobas? Z 480荧光定量基因扩增仪的电源开关，仪器自检。 依次打开电源、电脑显示器和电脑主机电源开关，进入计算机操作系统Windows XP。 双击图标，打开Cobas? Z 480 UDF软件，登陆用户名Pcr，密码Pcr480。 检测样品操作 打开扩增仪抽屉，将样品板放入仪器，缺角位置对准金属槽的左上角，然后闭合抽屉。 打开Cobas? Z 480 UDF软件，如果软件内已有保存好的模板，点击New Experiment from Template直接调用模板程序。如果需要建立模板，请按照4.3所示步骤建立模板，然后进行实验。 仪器软件使用 建立实验模板 点击软件主界面中的“New Experiment”，进入程序设定界面。 根据实验所用的检测模式选择“Detection Format”， “Block Type”，“Plate ID, (optional)”和“Reaction Volume”。 从Detection Format的下拉框中选择分析模式： 模块中选择合适的滤片组合 选择合适的模块 ： Optional，可以手工输入或通过扫描仪扫描 ：输入反应体积 10-100μl 定义PCR程序中的每个步骤及循环数和分析模式。利用+/-号增加/删除步骤。 设定每个步骤的温度，时间，变温速率及信号获取模式。 保存模板：点击save进行保存，保存的文件名中包含日期、实验目的和试剂商等 信息，模板的名称形式为年月日-测定项目英文缩写-试剂生产厂商的名称缩写。 样本编辑 4.3.2. = 1 \* Arabic 1 点击“Subset Editor” 进行亚组编辑 4.3.2.2 点击“Sample Editor” 模块 4.3.2.3 选择检测类型 4.3.2.4 选择要进行检测的子集 4.3.2.5 选择以将要进行的分析命名的样品列表，输入相应的样品信息。 程序运行： 点击“Experiment” 模块，回到程序设定界面。 如果已经加载样本，则窗口右下方的“Start Run”为可点击状态，点击即开始运行。若未加载样本，则该模块显示为灰色，只有在加载样本后才变成激活状态。 结果保存窗口自动跳出，输入文件名并选择一个合适的路径保存。保存实验名称形式为年月日-测定项目英文缩写-试剂生产厂商的名称缩写。 自动进入程序运行界面。 分析数据： 点击左侧“Analysis” 模块。 在“Creat new analysis”下拉框中选择分析的类型并双击，在跳出的对话框中从各下拉框中分别选定分析的范围、分析模式和分析的程序，并可命名该分析。 绝对定量分析：自动法（2ndDerivative Maximum 二次最大导数法） 点击“Calculate”查看结果。其中Threshold表示阈值，Baseline表示基线。 绝对定量分析：手动法（Fit Point