生物制药与药品检验技术 拼的就是“吸引力”—离子交换色谱法:何方神圣(原理) 课件:离子交换色谱法的原理.pptx

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;项目二 多肽类药物的 原料制备与质量检验;主讲教师:汤晓 ;学习内容: (1)什么是离子交换色谱法 (2)离子交换色谱法的原理 (3)分离蛋白质的原理 (4)离子交换色谱法的优点及应用 学习重点: 如何利用离子交换色谱法分离蛋白质;离子交换色谱法(ion-exchange chromatography, IEC):利用树脂(resin)对各种离子的亲和力不同(如Cl-、PO43-、Ac-),分离能离子化(ionized)的化合物 ;11个关键字:同类型的带电离子之间,可自由地相互交换和竞争结合 如:带相同电荷类型的离子,竞争性结合与其电荷相反的离子交换树脂 口诀:阳离子交换树脂交换阳离子,阴离子交换树脂交换阴离子 选择适当缓冲液、洗脱方式;三、分离蛋白质的原理;带负电荷的蛋白质(PO43-、COO-)可与离子交换树脂中的Cl-相交换而固定于树脂上,之后,通过NaCl或KCl洗脱溶液中的Cl-再使蛋白质从树脂上置换下来 用Cl-洗脱时,首先带走结合力弱的蛋白质( COO-) ,然后带走结合力更强的蛋白质(PO43-) ,以达到分离;优点:同时分离多种物质,灵敏度高、重复性及选择性好、分离速度快,最常用的层析法之一。 应用:常用于多种离子型生物分子的分离--蛋白质、氨基酸、多肽及核酸等。;总结:离子交换色谱法的原理

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