活血通络凝胶联合关节镜下关节清理术治疗膝OA的临床和实验.docxVIP

活血通络凝胶联合关节镜下关节清理术治疗膝 OA的临床和实验 研究目的膝骨性关节炎 (OA)是中老年常见的慢性、进展性疾病。近年 来 , 伴随着世界老龄化人口的增加 , 其发病率呈逐年上升的趋势。目前 , 尚缺乏根 治的方法。祖国医学将本病归入“骨痹”的范畴 , 瘀血阻络是主要病机 , 活血通 络是治疗本病的重要方法。而在西医病理方面 ,IL-1 与膝 OA关系密切 , 尤其是 IL-1 β, 研究表明抑制或减少 IL-1 β 产生的药物能够缓解膝 OA的症状 , 减缓膝 OA进展。关节镜下关节清理具有有创伤小、恢复快、简单、安全、疗效确切的 特点。因此 , 在本课题中 , 采用在关节镜下关节清理术基础上联合活血通络凝胶 外用治疗本病 , 观察其临床疗效及对患者血清、关节液 IL 的影响。同时 , 研究活血通络凝胶对兔软骨自由基、 IL-1 βmRNA、免疫组化等多方面的影响 , 从细胞因子角度分析活血通络中药外用治疗膝 OA的可能机制 , 为膝 OA的治疗研究提供全新的实验数据和思路。研究方法 1. 临床研究 96 例患者随机分为对照组和治疗组。治疗组在关节镜下关节清理术基础上 , 给予活血通络凝胶外用 , 每次 1g, 以覆盖患膝为度 , 每日 1 次,2 周为 1 疗程 , 间隔 2 天, 进入下一疗程 , 总疗程为 3 个 月；对照组仅给予关节镜下清理术。两组病例根据 Lequesne 的 OA严重性和活动性指数评估方法 , 制定膝 OA观察表进行计分 , 总分共 16 分, 分为以下 5 个等 级： 16 分～ 13 分,12 分～ 9 分,8 分～ 5 分,4 分～ 1 分,0 分。治疗后达到 0 为临 床治愈 , 进步 2 个等级为显效 , 进步 1 个等级为有效 ,1 个等级为无效；并于术 中和疗程结束后 1 个月抽取外周血与膝关节滑液 ,- 20℃保存 , 分批集体检测 , 采 用 ELISA 双抗体夹心法测定其中 IL-1 含量。 2. 实验研究 75 日龄日本大耳白兔 50 只, 采用改良的 Hulth 法造模。随机分为空白组、模型组、治疗组 , 其中模型 组 30 只, 其余每组 10 只。除空白组外 , 其余 40 只家兔均进行造模。于造模后 1 周开始进行治疗 , 采用 1 兔 1 笼喂养。模型组常规饲养；治疗组给予活血通络凝 胶局部涂抹 ,0.1g ／次 , 覆盖患膝为度 ,1 次／日 ,4 周为 1 疗程 , 共 3 个疗程。疗 程结束后 , 先从每只家兔耳缘静脉采血 3ml, 再进行空气栓塞处死动物 , 以锐利刀 片切取膝关节正中的部分软骨组织。分别进行血清 SOD、 LPO检测 , 软骨含水 量、己糖醛酸和羟脯氨酸检测 , 软骨及滑膜中 IL-1 βmRNA表达与 IL-1 β 含量测 定。研究结果 1. 临床研究治疗组总有效率为 93.6%, 对照组有效率为 83.7%, 治 疗组优于对照组 ,P0.05, 有显著性差异。两组血清和关节液中 IL-1 含量明显降 , 治疗组与对照组比较 , 优于对照组 ,P0.05, 有显著性差异。 2. 动物实验本实验采用 Hulth 法在 8 周时建立了兔膝 OA模型。 IL-1 β 表达在第 8 周时达到高峰 , 随后逐渐降低 , 而 IL-1 βmRNA初期升高后呈逐渐下调趋势。治疗后模型组血清 SOD含量升高 , 与模型组比较 ,P0.05, 具有显著性差异；血清 LPO含量明显降 , 与空白组比较 ,P0.01, 有显著性差异；治疗组软骨含水量含水量低于模型 ,P0.05, 具有显著差异 , 治疗组己糖醛酸含量与羟脯氨酸含量高于模型 ,P0.01, 具有显著差异。 IL-1 βmRNA表达明显降低 , 与模型组比较 ,P0.05, 差异有显著性意义。 IL-1 β 免疫组化灰度值表达也明显降低 , 与模型组比 较 ,P0.01, 差异有非常显著性意义。结论在关节镜下关节清理术的基础上, 辅以 外用具有活血通络作用的活血通络凝胶治疗膝关节骨性关节炎取得良好疗效, 活 血通络凝胶在术后起到明显的协同作用。本疗法具有创伤小、恢复快、简单、 安全、易于坚持等优点；同时通过降低 IL-1 的含量 , 可以有效的减缓软骨的退 , 延缓人工关节置换的时间；明显的减轻患者的痛苦和经济负担 , 提高他们的生活质量。采用 Hulth 建立了兔膝 OA模型 ,IL-1 β 表达在第 8 周时达到高峰 , 随后逐渐降低 , 而 IL-1 βmRNA初期升高后呈逐渐下调趋势。可能与早期创伤性反应有关 , 随着创伤的愈合 , 而表达逐渐下降。但在造模第 12 周时 ,X 线显示骨性关节炎晚期的表现 , 不适合于 OA早中期的研究