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化妆品生化基础 核酸的理化性质 3核酸的理化性质.ppt

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 热变性的DNA在复性过程中,具有碱基序列部分互补的不同的DNA之间或DNA与RNA之间形成杂化双链的现象。 7. 核酸分子杂交 (hybridization): 在核酸杂交分析过程中,常将已知顺序的核酸片段用放射性同位素或生物素进行标记。这种带有一定标记的已知顺序的核酸片段称为探针。 变性 复性 复性 核酸分子杂交的应用 研究DNA分子中某一种基因的位置 定两种核酸分子间的序列相似性 检测某些专一序列在待检样品中存在与否 是基因芯片技术的基础 名词解释: 变性和复性  分子杂交 增色效应和减色效应 1、热变性的DNA分子在适当条件下可以复性,条件之一是 A、骤然冷却 B、缓慢冷却 C、浓缩 D、加入浓的无机盐 2、在适宜条件下,核酸分子两条链通过杂交作用可自行形成双螺旋,取决于 A、DNA的Tm值 B、序列的重复程度 C、核酸链的长短 D、碱基序列的互补 3、核酸变性后,可发生哪种效应? A、减色效应 B、增色效应 C、失去对紫外线的吸收能力 D、最大吸收峰波长发生转移 4.下列关于核酸的说法正确的是 ( ) A.DNA是所有生物的遗传物质,具有特异性和多样性。 B.用DNA杂交技术可以鉴定印度洋海啸事件中遇难者的身份 C.当(A+T)/(G+C)的比值增大时,解链所需温度增加 D.tRNA上决定一个氨基酸的三个相邻的碱基组成一个密码子 2、什么是Tm值? Tm值大小与哪些因素有关? 1、试比较DNA和RNA在化学组成、分子结构及功能上的差异。 1纳米=10-9米 浮力密度buoyant density 是指通过用氯化铯等密度梯度离心法(平衡密度梯度法)所求的高分子物质的密度。 * 基因芯片技术是同时将大量的探针分子固定到固相支持物上,借助核酸分子杂交配对的特性对DNA样品的序列信息进行高效的解读和分析。 * 3、增色效应:含DNA和RNA的溶液经变性或降解后对紫外线吸收的增加。是由于碱基之间电子的相互作用的改变所致,通常在260nm测量。 4、减色效应:一种含有DNA或RNA的溶液与含变性核酸或降解核酸的相同溶液相比较,其紫外线吸收为低。是由于DNA双螺旋结构使碱基对的π 电子云发生重叠,因而减少了对紫外线的吸收。 5、DNA的变性:指核酸双螺旋的氢键断裂,变成单链,并不涉及共价键的断裂。 6、DNA的复性:变性DNA在适当条件下,又可使两条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构,全过程为复性。 热变性后的复性又称为退火。 7、核酸分子杂交:应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片断按碱基互补关系形成杂交双链分子,这一过程称为核酸的分子杂交。 * BDB * 1、试比较DNA和RNA在化学组成、分子结构及功能上的差异。 DNA RNA 化学组成 A、G、C、T ; A、G、C、U 脱氧核糖 ; 核糖 分子结构 一级结构:3′,5′-磷酸二酯键彼此连接而形成的核苷酸链; 二级结构:双螺旋; 三级结构:超螺旋、核小体 。 tRNA二级:三叶草; 三级: 倒L型 mRNA一级结构3端有polyA,5有帽子结构 功能 DNA携带遗传信息,决定细胞和个体的基因型 mRNA:在蛋白质合成中起着模板作用 ; rRNA:与蛋白质结合构成核糖体,是合成蛋白质的场所 ; tRNA:在蛋白质合成时起着携带活化氨基酸的作用 2、什么是Tm值? Tm值大小与哪些因素有关? 答:Tm值:通常把热变性过程中光吸收达到最大吸收(完全变性)一半(双螺旋结构失去一半)时的温度称为该DNA的熔点或熔解温度。 ⑴DNA的均一性:均一性愈高的样品,熔解过程的温度范围愈小 ⑵G-C含量:G-C含量高的DNA,tm值也高 ⑶介质离子强度:离子强度增大,DNA的Tm随之增大,变性温度范围则较窄。 * 《化妆品生化基础》 《核酸的理化性质》 《化妆品生化基础》 《核酸的理化性质》 《化妆品生化基础》 《核酸的理化性质》 《化妆品生化基础》 《核酸的理化性质》 《化妆品生化基础》 《核酸的理化性质》 《化妆品生化基础》 《核酸的理化性质》 《化妆品生化基础》 《核酸的理化性质》 《化妆品生化基础》 《核酸的理化性质》 《化

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