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?蛋白质第三节? ??蛋白质的结构与性质化学性质01.02.03.蛋白质的沉淀反应蛋白质的变性蛋白质的颜色反应PART.01蛋白质的沉淀反应蛋白质胶体溶液的稳定性与它的分子量大小、所带的电荷和水化作用有关。改变溶液的条件,将影响蛋白质的溶解性质。在适当的条件下,蛋白质能够从溶液中沉淀出来。
方法1.盐析作用在蛋白质溶液中加入定量的中性盐时,则能使蛋白质脱水并中和其电荷而从溶液中沉淀出来,中性盐的这种沉淀作用称为盐析作用。硫酸铵、硫酸钠和氯化钠是常见的几种蛋白质盐析剂。方法2.可逆沉淀可逆沉淀是在温和条件下,通过改变溶液的pH或电荷状况,使蛋白质从胶体溶液中沉淀分离。在沉淀过程中,结构和性质都没有发生变化,在适当的条件下,可以重新溶解形成溶液,所以这种沉淀又称为非变性沉淀。可逆沉淀是分离和纯化蛋白质的基本方法,如等电点沉淀法、盐析法和有机溶剂沉淀法等。
方法3.不可逆沉淀在强烈沉淀条件下,不仅破坏了蛋白质胶体溶液的稳定性,而且也破坏了蛋白质的结构和性质,产生的蛋白质沉淀不可能再重新溶解于水。由于沉淀过程发生了蛋白质的结构和性质的变化,所以又称为变性沉淀。如加热沉淀、强酸碱沉淀、重金属盐沉淀和生物碱沉淀等都属于不可逆沉淀。PART.02蛋白质的变性蛋白质的性质与它们的结构密切相关。某些物理或化学因素,能够破坏蛋白质的结构状态,引起蛋白质理化性质改变并导致其生理活性丧失。这种现象称为蛋白质的变性。发生变性的蛋白质一级结构(构型)和分子量不变,高级结构(构象)遭到破坏。变性蛋白质主要标志是生物学功能的丧失。溶解度降低,易形成沉淀析出,结晶能力丧失,分子形状改变,肽链松散,反应基团增加,易被酶消化。有些蛋白质的变性是可逆的,通过适当的方法(如透析)将变性剂除去后,蛋白质可以恢复其天然立体结构,这个过程称为复性。
变性蛋白质通常都是固体状态物质,不溶于水和其它溶剂,也不可能恢复原有蛋白质所具有的性质。所以,蛋白质的变性通常都伴随着不可逆沉淀。引起变性的主要因素是热、紫外光、激烈的搅拌以及强酸和强碱等。
1、物理因素:加热、激烈振荡、超声波、χ-射线、紫外线等变性蛋白在性质上的变化2、化学因素:?酸、碱、乙醇、丙酮等有机溶剂、浓脲溶液、盐酸胍及某些去垢剂(SDS)1、溶解度降低2、二、三级结构破坏,但肽键未破坏,故组成和分子量不变使蛋白质变性的理化因素3、化学反应基团增加4、失去螺旋结构,对称性下降,结晶能力丧失5、对蛋白酶水解敏感性增加6、生物活性降低或全部丧失本节课到此结束,谢谢大家
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