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甲基红试验 MR 及七叶苷水解试验
1、原理: 细菌分解葡萄糖产生丙酮酸后,由于代谢的途
径不同,有的细菌可使丙酮酸转化生成乳酸、琥珀酸、醋酸
和甲酸等大量酸性产物, 使培养基 pH 值下降至 pH4.5 以下,
使甲基红指示剂变红色,为甲基红试验阳性 ;有的细菌使
丙酮酸脱羧后形成酮、醇类中性产物,培养液 pH> 5.4,甲
基红指示剂呈桔黄色,为甲基红试验阴性。
2、试验方法: 挑取新鲜的待试培养物少许,接种于磷酸盐
葡萄糖蛋白胨水培养基,于 36±1 ℃或 30 ℃(以 30 ℃较
好)培养 3~5 天,从第 48h 起,每日取培养液 1mL ,加入甲
基红指示剂 1~2 滴,立即观察结果。
3、结果观察与记录
(1)呈鲜红色或橘红色为阳性,呈淡红色为弱阳性,记 MR
+;
(2)呈橘黄色或黄色为阴性, 记 MR - ,迄至发现阴性
并培养至第 5 天仍为阴性,即可判定结果。
应用 :主要用于大肠埃希菌(阳性)和产气肠杆菌(阴性)
的鉴别。
肠杆菌中许多细菌甲基红试验为阳性, 如沙门菌、 志贺菌、枸橼酸杆菌、变形杆菌等为阳性,但肠杆菌属和克
雷伯菌属为阴性。
(五) 七叶苷水解试验
1、原理: 七叶苷被细菌分解后,生成葡萄糖和七叶素,七
叶素与 Fe2+结合,生成黑色化合物,使培养基呈黑色, 以此
鉴别细菌。
2、试验方法: 将待试纯培养物少许,接种于七叶苷培养基,
于 36±1 ℃培养 24h,观察结果。
3、结果观察与记录
(1)培养基变为黑色或棕黑色者,为阳性,记录为 +
(2)培养基不变色者,为阴性,记录为 -
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