薄层色谱三种展开方式.pptx

总的来讲平面色谱的展开有三种几何形式即线性、环形及向心，见图 7-3-12。 ; 在使用平底展开室时，可将展开室一端垫高，使展开剂集中在薄层板点有样品的一 端，这样可以节省展开剂；如果薄层板需用展开剂饱和，可以将薄层板放在垫高的一端，饱 和后展开时可将另一端垫高，薄层板就可以接触展开剂进行展开，见图 7-3-14。如果需要 用与展开剂不同的溶剂蒸气（如挥发性酸或碱等）饱和薄层板时，可在平底展开室中放置盛 有某种挥发性溶剂的小杯，效果也非常理想。 ; 双底展开室的优点是节省展开剂，便于预饱和以及放置展开剂于一侧槽中，另一侧 槽内可放置另一种饱和蒸气用的溶剂，特别是代替在展开剂中互溶程度低，容易分层的混合 展开剂。 另一种上行展开方式是夹心式展开，由于展开室的体积大小及饱和程度影响薄层分 离而设计的，见图 7-3-15。 ;纸用的溶剂，展开剂从上而下流动，下行法中展开剂除毛细管作用外还有重力作用，因此展 速比上行法相对较快。 ; 5.水平展开 属于水平展开的设备有下列几种 （1）CAMAG 水平展开室 样品点在高效薄层板的两边，展开剂从两边向中心展开，因而分离的样 品数可以增加一倍。展开室见图 7-3-20,，此设备有 20cm×10cm 及 10cm×10cm 两种规格。 ; 将 10cm×10cm 的高效薄层板用刮板设备分割成 6 条，在设备的一端有 6 个溶剂槽，可以分别放置 6 种不同的展开剂；在设备的另一端有一个展开剂槽， 但有 6 条相应于薄层的凹槽，可以设计 6 种不同的预平衡条件，包括不同的溶剂 蒸气和相对湿度，这样可以同时选择最佳的展开剂和预平衡条件。 （3）GAMAG VARIO KS Chamber 为 20cm×20cm 的普通薄层设计的水平展开室，见图 7-3-21，这种展开 室节约展开剂，对同一块板上的几条样品带可用几种流动相同时展开，便于选择 最佳展开剂；可在展开时用适当的溶剂蒸气或水蒸气对薄层进行饱和，也可进行 夹心展开。 ; 反圆心式展开是样品点在薄层的周围，展开剂自四周向圆心展开，展速 快，可提高 Rf 值较大组分的检测灵敏度和定量准确性；反圆心式展开的专用反) 型展开室见图 7-3-23。 ;薄层???入氨气中薰 10min，取出后稍挥一下表面蒸气；第二次用乙醚-环己烷-甲 醇（5:3:0.5）展开，挥去展开剂后于波长 280nm 处测定原阿片碱、隐品碱及!( 别 隐品碱等) 种生物碱；第三次用甲苯-氯仿-甲醇-二乙胺（7:2:1:0.3）展开，挥 去展开剂后于 350nm 处测定黄连碱、小蘖碱及巴马亭 3 种生物碱。图 7-3-24 为 不同品种元胡及 11 种异喹啉生物碱的薄层色谱图。 ; ;仍与溶剂贮存器接触，而是通过在薄层板背部辐射加热蒸发溶剂或在板的正面通过惰性气流 使之干燥，见图 7-3-27 及图 7-3-28。用氮气流除去溶剂是为避免一些不稳定化合物受热氧 化或分解。 ; 在常规薄层色谱中，仅在展开时出现一次斑点浓集。如重复展开 次， 则最后的斑点宽度降低到（1-Rf）n× 起始宽度，但实际上没有（1-Rf）n 那么 明显，主要是展开时又扩散增宽，所以多次展开的优点不是在斑点的宽度上，而 是增加相邻斑点的距离，并经过一个最大值后再随着继续展开而降低。在 PMD 法中则在溶剂自薄层板上除去时尚能出现额外的斑点浓集，斑点浓集的程度随溶 剂前沿退缩的速率及 Rf 值而不同，溶剂前沿退缩使斑点大致如同溶剂前进时一 样再一次浓集。对 Rf 值低的斑点这种浓集更有效，这意味着分离效率及灵敏度 的提高。 PMD 仪器带有程序器，可将一个给定的分离程序参数送入程序器使之自 动完成。 5.CAMAG 自动展开室（ADC） 这种展开室是CAMAG 公司生产的程序多次展开设备，内存10 个预编程序， 可按需要设置，展开结束时自动停止，自动干燥薄层板，保证每次色谱展开保持 相同条件，提高了色谱分离的重现性，减少人为误差及展开剂的损失。 6.CAMAG 全自动多次展开系统（AMD） Burger 在 Perry 等的程序多次展开的基础上设计 AMD 全自动多次展开系 统，其特点是以微机预编程序，设计了一个展开剂极性很宽的梯度程序，展开剂 极性由高到低，每一次展距都比前一次增加，每次展开前溶剂按要求混合后由泵 送至展开室，展开后自动吹干，并开始下一个程序，这样不仅每次展开后斑点得 到浓集，从而增加了分离容量及改善了分离效果，而且可以用给定程序在同一薄 层上分离极性相差极大的组分。AMD 展开室，流程见图 7-3-3