K210 食品微生物检验技术、K209 农产品微生物检验技术 配套电子教材、配套电子教材 微生物检验技术-电子教材4-5-微生物致病菌检验-副溶血性弧菌检验.doc

农产品与食品质量检测技术教学资源库 《农产品/食品微生物检验技术》课程电子教材 微生物致病菌检验 副溶血性弧菌检验 副溶血性弧菌概述 副溶血性弧菌 副溶血性弧菌（Vibrio Parahemolyticus, VP）是一种嗜盐性细菌。副溶血性弧菌食物中毒，是进食含有该菌的食物所致，主要来自海产品，如墨鱼、海鱼、海虾、海蟹、海蜇，以及含盐分较高的腌制食品，如咸菜、腌肉等。本菌存活能力强，在抹布和砧板上能生存1个月以上，海水中可存活47天。临床上以急性起病、腹痛、呕吐、腹泻及水样便为主要症状。本病多在夏秋季发生于沿海地区，常造成集体发病。由于海鲜空运，内地城市病例也渐增多。 副溶血性弧菌对酸敏感，在普通食醋中5分钟即可杀死；对热的抵抗力也较弱。副溶血性弧菌食物中毒多发生在6~10月，海产品大量上市时。中毒食品主要是海产品，其次为咸菜、熟肉类、禽肉、禽蛋类，约有半数中毒者为食用了腌制品后。中毒原因主要是烹调时未烧熟煮透或熟制品被污染。 生物学特征 副溶血弧菌系弧菌科弧菌属，革兰染色阴性，兼性厌氧菌，为多形态杆菌或稍弯曲弧菌。本菌嗜盐畏酸。最适宜的培养基：温度为30℃-37℃，含盐2.5%-3%(若盐浓度低于0.5%则不生长），pH值为8.0-8.5。本菌对酸较敏感，当pH6以下即不能生长，在普通食醋中l-3min即死亡。在固体培养基上菌落常隆起，圆形，表面光滑，湿润。在3%-3.5%含盐水中繁殖迅速，每8～9min为一周期。对高温抵抗力小，50℃ 20 min；65℃ 5 min 或80℃ 1 min 即可被杀死。本菌对常用消毒剂抵抗力很弱，可被低浓度的酚和煤酚皂溶液杀灭。真核微生物 凡是细胞核具有核膜，能进行有丝分裂，细胞质中存在线粒体或同时存在叶绿体等细胞器的微小生物，都称为真核微生物。他们有完整的细胞核，真菌、原生动物、藻类都是真核微生物。 临床表现 潜伏期自1小时至4天不等，多数为10小时左右。起病急骤，常有腹痛、腹泻、呕吐、失水、畏寒及发热。腹痛多呈陈发性绞痛，常位于上腹部、脐周或回盲部。腹泻每日3～20余次不等，大便性状多样，多数为黄水样或黄糊便。约2%～16%呈典型的血水或洗肉水样便，部分病人的粪便可为脓血样或粘液血样，但很少有里急后重。 由副溶血性弧菌引起的食物中毒一般表现为急发病，潜伏期2~24h，一般为10h发病。主要的症状为腹痛，优势腹痛在脐部附近剧烈。腹痛是本病的特点，多为阵发性绞痛，并有腹泻、恶心、呕吐、畏寒发热，大便似水样。便中混有黏液或脓血，部分病人有里急后重，重症患者因脱水，使皮肤干燥及血压下降造成休克。少数病人可出现意识不清、痉挛、面色苍白或发绀等现象，若抢救不及时，呈虚脱状态，可导致死亡。 由于吐泻，患者常有失水现象，重度失水者可伴声哑和肌痉挛，个别病人血压下降、面色苍白或发绀以至意识不清。发热一般不如菌痢严重，但失水则较菌痢多见。国内报道的副溶血弧菌食物中毒，临床表现不一，可呈典型、胃肠炎型、菌痢型、中毒性休克型或少见的慢性肠炎型型。本病病程自1～6日不等，可自限，一般恢复较快。 治疗措施 支持及对症治疗 脱水者需输入生理盐水及葡萄盐水，或 口服补液盐，以纠正失水。血压下降者，除被动补充血容量，纠正酸中毒等外，可酌用 血管活性药； 抗菌药物 轻度患者可不用抗菌药物，较重者可给复方新诺明或庆大霉素、阿米卡星和诺氟沙星等 喹诺酮类抗菌药物（上述抗生素类可能使细菌产生耐药性，使用须谨慎）； 发生中毒后要立即停止食用可疑中毒食品，并到医院医治。副溶血性弧菌对氯霉素敏感。呕吐、腹泻严重者要补充水和盐。 副溶血性弧菌检验意义 食品中副溶血性弧菌的检验与评价可以及时准确地检测食品中副溶血性弧菌含量是评价食品卫生质量的一个重要指标，也是及时诊断和控制因副溶血性弧菌引起的疾病的重要手段。 副溶血性弧菌检验准备 实验设备 副溶血性弧菌检验用到的实验设备有：天平、均质器、超净工作台、生物安全柜、显微镜、恒温恒湿培养箱。 实验用具 副溶血性弧菌检验用到的实验用具有：无菌吸管、微量移液器及吸头、无菌手术剪、镊子、接种环。 培养基及试剂 副溶血性弧菌检验用到的培养基和试剂有： 选择性增菌试剂：3％氯化钠碱性蛋白胨水； 分离平板：硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖（TCBS）琼脂平板、弧菌显色培养基；注意：这两种选择性培养基均不可过度加热；使用前一天配制，且在48h内使用；倾注平板前需摇匀；不能反复溶解，平板需避光保存于室温环境。 纯化平板：3％氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂； 初步鉴定生化试剂：氧化酶试剂、革兰氏染色液、3％氯化钠三糖铁（TSI）琼脂斜面、3%氯化钠半固体培养基、嗜盐性试验培养基； 确定鉴定生化试剂：3％氯化钠甘露醇试验培养基、3％氯化钠赖氨酸脱羧酶试验培养基、3％氯化钠MR-VP培养基、Voges-Pr