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医院血脂检验操作规程 标本采集与处理 1．受检者抽血前二周应保持平衡的饮食习惯，近期体重稳定无外伤，手术等意外情况。并注意如有使用降糖、降脂、降压、避孕药，β-受体阻滞剂，免疫抑制剂，激素药物等，则应根据所用药物特性停药数天或数周后再作血液脂类检测。 2．空腹抽血，TG，脂蛋白，载脂蛋白测定应至少禁食12小时（仅作胆固醇测定不必强求空腹）24小时内不作剧烈运动。抽血前不要久站立。至少应静坐5分钟。抽血时止血带使用不可超过1分钟。 3．标本用血清，也可用肝素或抗凝之血浆。浓度不宜太高。 4．血标本室温放置不得超过3h，放置30~45分钟后应即时分离出血清（浆）盖封於4℃冰箱中可稳定至少4天，如需长期保存，应於-70℃中冰冻存放，不可反复冻融。 血清总胆固醇（TC）测定 酶法（CHOD~PAP法） 【 试 剂 】 市售现成试剂。 【 操 作 】 按试剂及仪器使用说明书要求设定程序，输入参数用自动或半自动生化分析仪测定（速率法）终点法可手工操作，用普通分光光度计比色测定。波长500nm或520nm。 【 标 本 】 血清（浆）参看本节的标本采集与处理。 【 附 注 】 本法为中华医学会检验学会推荐的TC测定常规方法（中华医学检验杂志，1995、18：185）。 胆固醇标准液以定值参考血清为宜，而不宜用Chol的水溶液作标准。Chol定值质控血清亦不应用作标准液。 主要技术指标：终点法批内CV＜%、批间CV≤%。灵敏度：显色剂用酚时，L(200mg/dl)时的吸光度（A 500nm）约~，故A 500nm=时TC浓度约为L(3mg/dL)。测定范围：当血清与试剂用量之比为1:100时其测定的上界为13mmo1/L(500ng/dL)。 血清甘油三酯（TG）测定 酶法（GPO~PAP法） 【 试 剂 】 市售现成试剂。有两种。 一步酶法单一试剂，二步酶法双试剂。 标准液（参考物）一步酶法之用三油酸甘油酯水溶液，也可用甘油，但甘油不适用於二步酶法。 【 操 作 】 按试剂及仪器使用说明书要求设定程序和参数，用自动或半自动生化分析仪测定，终点法可用普通分光光度计手工操作，比色测定。波长500nm。 【 标 本 】 血清（浆）参看本节标本采集与处理。 【 附 注 】 本法在操作程序上分为一步酶法与二步酶法，二步酶法为中华医学检验学会的推荐方法（中华医学检验杂志1995、18：249）。现阶段允许二法并存，要求逐步过渡到统一采用二步酶法，在方法尚未统一前，实验室报告TG测定结果时应注明“除FG值”或“未除FG值”。 主要枝术指标：酶试剂用缓冲液配制后，20~25℃应稳定1天，4℃可稳定3~7天，试剂空白为A500nm≤；显色后稳定≥30min：测定上界L(100mg/dL)； 精密度：批内CV≤3%，批间CV≤5%：灵敏度：2mmo1/L TG A 500nm≥。 血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)测定 磷钨酸镁沉淀法 【 试 剂 】 市售成套试剂，沉淀剂，酶试剂（同TG测定）。 【 操 作 】 按试剂盒说明书操作。 1．沉淀含apoB的脂蛋白。 2．测定上清液（只含HDL）的胆固醇含量（方法同酶法TC测定）。 【 标 本 】 血清（浆）。 硫酸葡聚糖一镁沉淀法 【 试 剂 】 市售成套试剂：总HDL试剂，HDL3试剂，酶试剂（同TC试剂）。 【 操 作 】 按试剂说明书操作： 1．沉淀含apoB的脂蛋白，（总HDL试剂）； 2．沉淀含apoB的脂蛋白及HDL2（HDL3试剂）； 3．测定总HDL~C及HDL3~C（同酶法TC测定），并计算出HDL2~C量。 【 标 本 】 血清（浆）血样在室温中不宜久放，应即时测定，原则应低温保存。 直接HDL~C测定法 【 试 剂 】 市售专门的试剂，无沉淀剂。酶试剂同TC测定。（如日本第一化学药品株式会社的产品）。 【 操 作 】 按试剂盒及仪器使用说明书要求设置程序，输入参数直接用自动或半自动生化分析仪测定，无须沉淀离心分离出HDL步骤。 【 标 本 】 血清（浆）。 血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）测定 1．Friedwald工式计算法： （1）LDL-C=TC―HDL-C―TG/5（以mg/dl为单位计）； （2）LDL-C=TC―HDL-C―TG/