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ICS 11.220 B 41 团 体 标 准 T/CVMA 32-2020 禽白血病病毒抗原化学发光免疫分析检测 方法 chemiluminescent immunoassay for detection of avian leukusis v irus antigen 2020-12-22 发布 2020-12-22 实施 中 国 兽 医 协 会 发 布 T/CVMA 32-2020 前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本文件由中国兽医协会提出并归口。 本文件起草单位：中国动物疫病预防控制中心、新疆生产建设兵团动物疫病预防控制中心、洛阳现 代生物技术研究院有限公司、黑龙江省动物疫病预防控制中心、重庆市动物疫病预防控制中心、新疆维 吾尔自治区动物疫病预防控制中心、西藏自治区动物疫病预防控制中心、广西壮族自治区动物疫病预防 控制中心、江西省动物疫病预防控制中心。 本文件主要起草人：孙雨、王传彬、顾小雪、马英、赵晓春、肖颖、李秀梅、宋晓晖、刘亚涛、张 旭、蒋菲、王睿男、杨林、孙航、姚强、央珍、刘近、杨晓帆、王文、林汉亮、邹联斌、甘平、毕一鸣、 魏巍、张力、殷涛、刘颖昳、徐琦、胡冬梅、韦正吉、刘明瑞、耿玉静、任雪建、吴彬、吕园园。 I T/CVMA 32-2020 禽白血病病毒抗原化学发光免疫分析检测方法 1 范围 本文件规定了禽白血病病毒抗原化学发光检测试剂盒检测禽白血病病毒抗原的检测方法的试剂与 材料、仪器与设备、技术原理、实验前准备工作、操作步骤、试验成立标准、结果判定标准等内容。 本文件适用于禽类泄殖腔拭子、蛋清、胎粪样品中禽白血病病毒抗原的检测。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范执行。 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 试剂与材料 4.1 禽白血病病毒p27 蛋白单克隆抗体，按照附录A 制备 4.2 禽白血病病毒p27 蛋白酶标单克隆抗体，按照附录B 制备 4.3 PBST （pH 值7.2 ），按照附录C.1 配制 4.4 包被缓冲液，按照附录C.2 配制 4.5 封闭液，按照附录C.3 配制 4.6 酶结合物稀释液，按照附录C.4 配制 4.7 阴性对照，按照附录C.5 配制 4.8 阳性对照，按照附录C.6 配制 4.9 化学发光底物A ，按照附录C.7 配制 4.10 化学发光底物B ，按照附录C.8 配制 5 仪器与设备 化学发光免疫分析仪、分析天平、洗板机、37 ℃温箱、2 ℃~8 ℃冰箱、﹣20 ℃冰箱、单道微量移 液器（0.5 µL~ 10 µL；10 µL~ 100 µL；20 µL~200 µL；100 µL~ 1000 µL）、多道移液器（300 µL）、NUNC 反应板、血清稀释板（96 孔一次性U 型血凝板或96 孔细胞培养板）、一次性注射器（5 mL 、10