T CVMA 47-2020 猫星状病毒RT-PCR检测方法.pdf

ICS 11.220 B 41 团 体 标 准 T/CVMA 47-2020 猫星状病毒RT-PCR 检测方法 Detection of feline astrovirus by RT-PCR 2020-12-22 发布 2020-12-22 实施 中 国 兽 医 协 会 发 布 T/CVMA 47-2020 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020 《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由青岛农业大学提出。 本文件由中国兽医协会归口。 本文件起草单位：青岛农业大学、中国动物卫生与流行病学中心、中国兽医药品监察所、上海基灵 生物科技有限公司。 本文件主要起草人：黄娟、单虎、王媛媛、印春生、朱旭。 I T/CVMA 47-2020 猫星状病毒RT-PCR 检测方法 1 范围 本文件规定了猫星状病毒RT-PCR检测方法。 本文件适用于猫粪便和肛拭子星状病毒核酸的检测。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB 19489 实验室生物安全通用要求 NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 RT-PCR ：逆转录-聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction ） FeAstV ：猫星状病毒（feline astrovirus ） PBS ：磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution ） DNA ：脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid ） RNA ：核糖核酸（ribonucleic acid ） cDNA ：互补脱氧核糖核酸（complementary DNA ） PCR ：聚合酶链反应（polymerase chain reaction ） 5 试剂和材料 5.1 试剂 5.1.1 总则：除非另有说明，所用试剂均为分析纯，试验用水符合GB/T 6682 的要求，所有试剂均用 无RNA 酶的容器分装。 5.1.2 商品化RNA 提取试剂盒。 5.1.3 商品化反转录试剂盒。 5.1.4 rTaq DNA 聚合酶。 5.1.5 DNA 分子量标准。 1 T/CVMA 47-2020 5.1.6 灭菌去离子水。 5.1.7 0.01 M PBS 缓冲液（pH 7.4 ，含青霉素100 U/mL 、链霉素0.1 mg/mL ），其配制按照附录A 中的A.1 进行。 5.1.8 TAE 电泳缓冲液，其配制按照附录A