T CVMA 23-2020 猪伪狂犬病毒抗体荧光免疫层析检测法.pdf

ICS 11.220 B 41 团 体 标 准 T/CVMA 23-2020 猪伪狂犬病毒抗体荧光免疫层析检测 法 The detection of PRV antibody by fluorescence immunochromatography assay 2020-12-22 发布 2020-12-22 实施 中 国 兽 医 协 会 发布 1 T/CVMA 23-2020 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020 《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》 的规定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由四川省兽医协会提出。 本文件由中国兽医协会归口。 本文件起草单位：四川省动物疫病预防控制中心，成都微瑞生物科技有限公司。 本文件主要起草人：陈斌、陈弟诗、周明忠、张毅、阳爱国、王泽洲、章建、邓飞、贺冬 梅、丁梦蝶、裴超信、吴冠英、邱明双、张永宁、吴宣。 I T/CVMA 23-2020 猪伪狂犬病毒抗体荧光免疫层析检测法 1 范围 本文件规定了猪伪狂犬病毒抗体(gB 和 gE) 荧光免疫层析检测法的原理、仪器设备、操作 步骤、结果分析。 本文件适用于猪血清中猪伪狂犬病病毒gB 和gE 特异性抗体的快速检测。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的 引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有 的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB 19489 实验室 生物安全通用要求 NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 荧光免疫层析检测法 The Fluorescence Immunochromatography Assay FICA 是以镧系荧光纳米微球作为示踪物，标记抗原或抗体与待测物进行免疫反应，经荧光免疫 分析仪测定最终产物的荧光强度，从而得出待测物浓度的检测方法。 4 原理 采用抗原夹心法和荧光免疫层析法相结合技术，检测动物血清样本中的猪伪狂犬病抗体(gB 和 gE) 。当血清样本中抗体与荧光纳米微球标记的伪狂犬重组抗原接触反应后形成复合物，继 续与硝酸纤维素膜上检测线包被的伪狂犬重组抗原形成夹心复合物反应，其余物质继续向前层 析在C 线捕获住“荧光标记鸡IgY+ 山羊抗鸡IgY ”免疫结合物，最后用高敏荧光分析仪读取检测 卡上的荧光信号。 5 仪器、材料与试剂 5.1 仪器 5.1.1 高敏荧光分析仪：能在激发波长为380 nm~420 nm，检测波长为605 nm~625 nm 条件下 检测 5.1.2 单道可调移液器（20 μL~200 μL ）和（0.5 μL~ 10 μL） 5.1.3 分析天平：感量万分之一（0.0001 g ）