GENMEDnbsp罗丹明（RHODANMINE）溶液产品说明书（中文版）.pdfVIP

GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A GMS12195 v.A GENMED 罗丹明 123 （RHODANMINE123 ）溶液产品说明书（中文版） 主要用途 GENMED 罗丹明 123 （RHODANMINE123 ）溶液是一种旨在通过选择性聚集在线粒体或特异性排外出细胞 产生的荧光检测信号的变化，快速、敏感、可靠地活体测定细胞功能的常用荧光染料。适用于各种动物和 人体细胞的染色，用于细胞生物学和药物学的研究。产品严格无菌，即到即用，性能稳定，荧光清晰。 技术背景 罗丹明 123 （Rhodamine123 ），又称双 6 －氨基 3 －亚胺基 3H －氧杂蒽－9－yl 苯甲酸甲酯（2- （6-Amino- 3-imino-3H-xanthen-9-yl ）benzoic acid methyl ester ），其分子式为 C H N O . HCl ；分子量为344.4 。罗丹 21 16 2 3 明 123 是一种膜电位敏感的亲脂性阳离子荧光染料，可以自由进入细胞，高度选择性地聚集在线粒体。同 时被多药耐药细胞（Multidrug Resistance ；MDR ）有效排出，在P －糖蛋白调节因子（P －gp modulator ）的 存在下，抑制其排出。由此，用于研究线粒体功能和 P －糖蛋白活性的荧光标记探针。其激发波长为在 480nm 或 500nm，散发波长 530nm 。 产品内容 GENMED 染色液（Reagent A ） （50 微摩尔） 0.5 毫升 产品说明书 1 份 保存方式 保存 GENMED 染色液（Reagent A）在－20℃冰箱里，避免光照，有效保证6月 用户自备 HANK 平衡盐缓冲溶液（GMS12028 ）或PBS 缓冲溶液（GMS12033 ）：用于清理细胞 胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（GMS12024 ）：用于细胞脱离 完全细胞培养液（GMS12052 ）：用于细胞处理所需的培养基 15毫升锥形离心管：用于细胞收集的存放 微型台式离心机：用于细胞沉淀收集 台式离心机：用于细胞沉淀收集 1.5 毫升离心管：用于细胞检测操作的容器 2毫升离心管：用于染色工作液配制的容器 37℃培养箱：用于孵育反应物 比色皿：用于荧光定量分析 荧光显微镜：用于观察荧光细胞 荧光分光光度仪：用于定量检测荧光细胞和脂类产量 1 实验提示 方法一、间接法 实验开始前，将试剂盒里的 GENMED 染色液（Reagent A）冻融，置入冰槽里。然后进行下列操作。 1． 开启荧光显微镜或荧光分光光度仪 2． 小心抽掉25cm2 细胞培养瓶里的培养液 3． 加入3毫升用户自备的 HANK 平衡盐缓冲溶液或 PBS 缓冲溶液到细胞培养瓶，覆盖培养瓶表面 4． 小心抽掉清洗液 5． 加入1毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，铺满整个培养平面 6． 置入37℃培养箱1分种 7． 振动培养瓶，使细胞脱落 8． 加入5毫升用户自备的完全细胞培养液 9． 移入15毫升锥形离心管 10．放进台式离心机离心10分钟，速度为300g 11．小心抽去上清液 12．加入500微升升用户自备的HANK 平衡盐缓冲溶液或 PBS 缓冲溶液，充分混匀 13．移入到新的1.5毫升离心管 14．加入25微升GENMED 染色液（Reagent A）到离心管 15．用手指轻轻弹动离心管，使其充分混匀 16．在37℃培养箱孵育10分钟，避免光照 17．放进微型台式离心机离心30 秒，速度为16000g（或13000RPM ，例如 eppendorf 5415） 18．小心抽去上清液 19．加入1毫升用户自备的HANK 平衡盐缓冲溶液或 PBS 缓冲溶液，充分混匀 20．（选择步骤）放进微型台式离心机离心30 秒，速度为16000g（或13000RPM ，例如 eppendorf 5415） 21．（选择步骤）小心抽去上清液 2